[发明专利]血清中鸟嘌呤的测定方法

摘要

本发明公开了一种血清中鸟嘌呤的测定方法，属于利用可见光，通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：试剂II中仅有鸟嘌呤脱氨酶有效组分，指示剂及其它有效组分同在试剂I中；其测定方法为：血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中游离氨与试剂Ⅰ中α‑酮戊二酸、NADH在谷氨酸脱氢酶作用下生成NAD⁺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，鸟嘌呤在鸟嘌呤脱氨酶水解后生成氨，经反应生成NAD⁺，仪器在334nm～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的NAD⁺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的NAD⁺可直接测出鸟嘌呤的含量。本发明检测时不受内源性游离氨影响，本方法是一种快捷、准确性更高的血清中鸟嘌呤检测方法。

主权项

1.一种血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于试剂Ⅰ中含有谷氨酸脱氢酶，α‑酮戊二酸，NADH及适量防腐剂；试剂Ⅱ内含有鸟嘌呤水解酶及适量防腐剂；其测定方法为：待测血清样品与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中游离氨与试剂Ⅰ反应生成NAD+，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，鸟嘌呤在鸟嘌呤脱氨酶水解后产生氨，经反应也生成NAD+，仪器在334nm～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的NAD+为空白，从试剂Ⅱ反应产生的NAD+计算出鸟嘌呤的含量，计算公式为：OD鸟嘌呤＝OD2‑OD1×[SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]鸟嘌呤浓度＝F×OD鸟嘌呤其中OD鸟嘌呤是鸟嘌呤产生的吸光度，OD1是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD2是样品加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，R1V1是试剂Ⅰ的体积，R2V2是试剂Ⅱ的体积，F是校正因数。