[发明专利]血清中鸟嘌呤的测定方法

权利要求书

1.一种血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于试剂Ⅰ中含有谷氨酸脱氢酶，α-酮戊二酸，NADH及适量防腐剂；试剂Ⅱ内含有鸟嘌呤水解酶及适量防腐剂；其测定方法为：待测血清样品与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中游离氨与试剂Ⅰ反应生成NAD⁺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，鸟嘌呤在鸟嘌呤脱氨酶水解后产生氨，经反应也生成NAD⁺，仪器在334nm～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的NAD⁺为空白，从试剂Ⅱ反应产生的NAD⁺计算出鸟嘌呤的含量，计算公式为：

OD_鸟嘌呤＝OD₂-OD₁×[SV+R₁V₁)/(SV+R₁V₁+R₂V₂)]

鸟嘌呤浓度＝F×OD_鸟嘌呤

其中OD_鸟嘌呤是鸟嘌呤产生的吸光度，OD₁是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD₂是样品加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，R₁V₁是试剂Ⅰ的体积，R₂V₂是试剂Ⅱ的体积，F是校正因数。

2.根据权利要求1所述的血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于指示反应为谷氨酸脱氢酶催化氨、α-酮戊二酸及NADH生成NAD⁺的指示反应。

3.根据权利要求1所述的血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于试剂Ⅰ及试剂Ⅱ中防腐剂选自Proclin-300。

4.根据权利要求1所述的血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于试剂Ⅰ每升Tris-HCl缓冲液内含Tris-HCl 80mmol～120mmol、谷氨酸脱氢酶4000～8000U、NADH 0.2～0.6mmol,Proclin-300100μl～300μl；试剂Ⅱ每升Tris-HCl缓冲液内含Tris-HCl 80mmol～120mmol、鸟嘌呤水解酶1600U～2400U、Proclin-300100μl～300μl。

5.根据权利要求4所述的血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于试剂Ⅰ和试剂Ⅱ中Tris-HCl缓冲液的pH值为8.2±0.2。

6.根据权利要求4所述的血清中鸟嘌呤的测定方法，其特征在于测定所用各物品的体积比为：样品∶试剂I∶试剂II＝1∶80～120∶40～60。