[发明专利]一种工程菌及其在丹参素和α-酮戊二酸联产中的应用有效
| 申请号： | 201810352742.9 | 申请日： | 2018-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN108949657B | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 蔡宇杰;熊天真;蒋静;丁彦蕊;白亚军;郑晓晖 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P7/42;C12P7/50;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种工程菌及其在丹参素和α‑酮戊二酸联产中的应用，属于生物工程技术领域。本发明构建了一种新型的三酶共表达基因工程菌，该菌可应用于光学纯的3‑(3,4‑二羟基苯基)‑2‑羟基丙酸的生产。本发明选择的(D/L)‑α‑羟基羧酸脱氢酶均具有底物专一性差，光学专一性强的特点，可生产光学纯的D‑丹参素和L‑丹参素，同时联产α‑酮戊二酸。进一步地，通过敲除或强化表达大肠杆菌基因组上的相将关基因促进底物的转运及减少产物的分解，提高了重组菌的生产效率。利用本发明的重组菌转化生产丹参素和α‑酮戊二酸的方法简单且原料易得，杂质少,具有良好的工业化应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 丹参素 酮戊二酸 联产 工程菌 光学纯 重组菌 生物工程技术领域 大肠杆菌基因组 应用 底物专一性 二羟基苯基 工业化应用 基因工程菌 生产效率 羟基丙酸 羟基羧酸 共表达 脱氢酶 专一性 底物 构建 敲除 生产 转运 分解 基因 转化 | ||
【主权项】：
1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌同时表达了外源L‑谷氨酸脱氢酶、α‑羟基羧酸脱氢酶和L‑氨基酸氧化酶，并在宿主大肠杆菌的基础上敲除了酚类化合物分解相关的基因；所述L‑谷氨酸脱氢酶是NCBI上登录号为WP_000373021.1、WP_011338202.1、WP_003497202.1或WP_010886557.1的L‑谷氨酸脱氢酶；所述α‑羟基羧酸脱氢酶是NCBI上登录号为WP_003643296.1、WP_002335374.1、或EEI22188.1的D‑α‑羟基羧酸脱氢酶，或NCBI上登录号为WP_013858488.1、WP_003607654.1或WP_035430779.1的α‑羟基羧酸脱氢酶；所述L‑氨基酸氧化酶是NCBI上登录号为WP_004244224.1、OAT30925.1、EFE55026.1、WP_036414800.1或WP_026879504.1的L‑氨基酸氧化酶；所述酚类分解基因为原儿茶酸2,3‑双加氧酶基因hpaD、2,3‑二羟苯基丙酸盐1,2双加氧酶基因mhpB中的任意一种或者两种组合。
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