[发明专利]基于复合编码探针杂交的DNA检测方法及复合编码探针在审
| 申请号： | 201810343607.8 | 申请日： | 2018-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN108531566A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 戴丽丽;刘旭宏;王小波;陈月琴 | 申请（专利权）人： | 厦门基科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 361006 福建省厦门市自*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了基于复合编码探针杂交的DNA检测方法及复合编码探针，所述复合编码探针为由第一子探针和第二子探针部分配对所形成的一双发卡结构的核酸序列，其包含：loop环状区、茎末端区和修饰基团区；所述第一子探针和第二子探针上位于茎末端区的碱基序列相互配对，所述第一子探针和第二子探针上位于loop环状区的碱基序列分别与待测靶标基因的正义链和反义链的不同区域的碱基序列构成互补序列；所述修饰基团区的数量为二，该修饰基团区包括相配合的荧光基团和淬灭基团。本发明提供的检测方法具有快速简单、成本低、非仪器依赖性、多重检测能力等特点，可多重实时检测的靶点数目明显多于目前仪器可检测的荧光通道数目。 | ||
| 搜索关键词： | 探针 复合编码 碱基序列 修饰基团 探针杂交 环状区 末端区 配对 靶标基因 淬灭基团 多重检测 发卡结构 核酸序列 互补序列 实时检测 荧光基团 荧光通道 反义链 可检测 正义链 靶点 检测 配合 | ||
【主权项】：
1.基于复合编码探针杂交的DNA检测方法，其特征在于，包括以下步骤：a.根据待测靶标基因的特异性序列合成复合编码探针；所述复合编码探针为由第一子探针和第二子探针部分配对所形成的一双发卡结构的核酸序列，其包含：loop环状区、茎末端区和修饰基团区；所述第一子探针和第二子探针上位于茎末端区的碱基序列相互配对，所述第一子探针和第二子探针上位于loop环状区的碱基序列分别与待测靶标基因的正义链和反义链的不同区域的碱基序列构成互补序列；所述修饰基团区的数量为二，该修饰基团区包括相配合的荧光基团和淬灭基团；b.根据待测靶标基因的特异性序列合成上游引物和下游引物；c.采用上述获得的探针和引物构建反应体系，对待测靶标基因进行PCR扩增；d.在PCR扩增反应结束后，收集PCR产物的荧光信号以形成相应的扩增曲线，对待测靶标基因进行分析。
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