[发明专利]一种产甜菊糖菌株的快速筛选方法

摘要

本发明提供了一种产甜菊糖菌株的快速筛选方法，属于微生物学领域。该方法首先将培养出的待测样品中的微生物转移至糖发酵培养基中进行发酵，再根据硫酸铈铵‑亚硫酸钠体系荧光法，在激发波长254nm，发射波长357nm处测定甜菊糖标准品待测液的荧光强度，并制作甜菊糖标准曲线，最后根据待测样品的荧光值匹配实际样品液中甜菊糖的浓度，从而实现产甜菊糖菌株的筛选。本发明的筛选方法快速、简便，能达到快速筛选产甜菊糖菌株的目的。

主权项

1.一种产甜菊糖菌株的快速筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)微生物培养：用无菌水将待测样品稀释10倍，振荡，取上清液涂布于牛肉膏蛋白胨培养基中，恒温培养至长出单菌菌落；(2)微生物发酵：将步骤(1)培养出的单菌菌落接种至糖发酵培养基中，进行糖发酵，得到发酵液；(3)甜菊糖标准曲线的制作：用无菌水配制甜菊糖母液，用糖发酵培养基作为稀释液对母液进行逐级稀释，得到一组甜菊糖标准品待测液；取每个甜菊糖标准品待测液3～5mL，Na2SO3溶液3～5mL，硫酸铈铵溶液1～3mL，混合均匀，将混合液放入50～70℃下水浴5～30min，水浴结束后冷却至15～30℃；设置荧光光谱仪的激发波长为254nm，发射波长为357nm，检测冷却后混合液的荧光强度，以甜菊糖浓度为横坐标，以荧光强度为纵坐标作甜菊糖标准曲线；(4)微生物筛选：将步骤(2)得到的浑浊发酵液离心，取上清，过滤，获得样品液，按照步骤(3)的操作配制混合液，并测其荧光强度，将测得的荧光强度代入甜菊糖标准曲线中，获得样品液中甜菊糖的浓度，当甜菊糖的浓度大于零时，对应步骤(1)中的单菌菌落即为产甜菊糖菌株。