[发明专利]缓释IGF-1生长因子的肌肉脱细胞材料的制备方法

摘要

本发明提出了一种缓释IGF‑1生长因子的肌肉脱细胞材料的制备方法，本发明将哺乳动物任意大小的骨骼肌肉组织经含蛋白酶抑制剂的PBS、含KCl的PBS缓冲液、含Triton X的PBS缓冲液、含SDS的PBS缓冲液、含DNA酶的PBS缓冲液处理，获得可自发、持续缓释IGF‑1生长因子的脱细胞肌肉材料。本发明能同时对肌肉组织上的细胞进行完全去细胞化处理，且条件温和、无ECM损害、快速稳定，所得肌肉脱细胞材料不仅可以自发、持续缓释IGF‑1生长因子，还具有生物相容性好、可塑性强、生物力学强度高等优点，可用于修复临床上各类病因造成的肌肉损伤、退变相关疾病。

主权项

1.缓释IGF‑1生长因子的肌肉脱细胞材料的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：(1)取12h以内宰杀的任意哺乳动物的骨骼肌肉组织，用剪刀除去肌肉上的脂肪，用含蛋白酶抑制剂的生理盐水漂洗3次，每次20min，去除血液，贴附的脂肪碎片和其他杂质。(2)在含蛋白酶抑制剂的PBS缓冲液中，在4℃温度下用摇床100rpm震荡24‑48小时；然后用液氮冻融3个循环；(3)在KCL的PBS缓冲液中，加入混合抗菌液，在4℃温度下用摇床100rpm震荡2‑12小时；(4)在含Triton X的PBS缓冲液中，加入混合抗菌液，在4℃温度下用摇床100rpm震荡8‑24小时；(5)在含NaCL的PBS缓冲液中，在4℃温度下用摇床100rpm震荡2‑12小时；(6)在含SDS的PBS缓冲液中，加入混合抗菌液，在4℃温度下用摇床100rpm震荡8‑24小时；(7)在含DNA酶的PBS缓冲液中，加入混合抗菌液，37℃摇床100rpm震荡6‑12小时；步骤(2)‑(7)中，每个步骤完成后均用生理盐水冲洗5小时。