[发明专利]利用体外定量溶血分光光度法测定鸡法氏囊素效力的方法在审

专利信息
申请号: 201810265808.0 申请日: 2018-03-28
公开(公告)号: CN108489918A 公开(公告)日: 2018-09-04
发明(设计)人: 吕小婷;叶盛聪;邱灵姗;陈盛勇;刘楚楚;徐磊;刘友霖 申请(专利权)人: 派生特(福州)生物科技有限公司
主分类号: G01N21/31 分类号: G01N21/31;G01N1/28
代理公司: 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 代理人: 戴雨君
地址: 350000 福建省*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明公开了利用体外定量溶血分光光度法测定鸡法氏囊素效力的方法,首先无菌制备猪脾脏淋巴细胞悬液,加入SRBC及完全培养基放置37℃培养进行致敏,一定时间后再加入SRBC和补体,放置37℃孵育,取上清放置酶标仪测定OD值,然后通过公式计算法氏囊素活力。本发明方法具有灵敏、稳定、客观等优点,并且操作简便,周期短,成本低。
搜索关键词: 定量溶血分光光度法 鸡法氏囊 体外 淋巴细胞悬液 公式计算法 酶标仪测定 完全培养基 猪脾脏 补体 孵育 囊素 无菌 致敏 制备 灵敏
【主权项】:
1.利用体外定量溶血分光光度法测定鸡法氏囊素效力的方法,其特征在于:其包括以下步骤:1) 取细胞培养板,分为空白组、对照组和试验组,每组设置若干个平行孔,具体如下:空白组每孔加入250 体积份猪脾脏淋巴细胞悬液和250体积份生理盐水;对照组每孔加入250 体积份猪脾脏淋巴细胞悬液、242.5 体积份生理盐水和7.5 体积份5~10% SRBC悬液;试验组每孔加入250 体积份猪脾脏淋巴细胞悬液、242.5 体积份鸡法氏囊素溶液和7.5 体积份5~10% SRBC悬液;将各组细胞培养72~84 h;2)每组各孔分别加入500 体积份 0.18~0.22% 致敏SRBC悬液,继续培养1~2 h后,1500~2500 r/min离心5~10 min,各孔取500 体积份上清液放置于另一细胞培养板中,采用酶标仪测定各孔上清液在415 nm波长处的吸光度,记为OD415nm ;3)鸡法氏囊素活力A=(试验组OD415nm 均值‑对照组OD415nm均值)/对照组OD415nm均值)×100%。
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