[发明专利]一种从人外周血CTC中检测EML4-ALK融合基因亚型荧光定量PCR方法在审
| 申请号： | 201810207060.9 | 申请日： | 2018-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN109136343A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 赵刚 | 申请（专利权）人： | 江苏苏博生物医学股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6851;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 223800 江苏省宿*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及肿瘤细胞检测领域，具体涉及一种从人外周血CTC中检测EML4‑ALK融合基因多种常见亚型的荧光定量PCR方法。采用差减法从人外周血中富集CTC，设计并获得EML4‑ALK融合基因亚型特异性引物和特异性Taqman探针，采用荧光定量PCR方法Taqman探针法，EML4‑ALK融合基因亚型阳性质粒标准品为模板进行PCR扩增，并在PCR过程中利用Taqman探针的水解，通过搜集特异荧光信号来检测EML4‑ALK融合基因亚型的表达。有益效果：本技术方案检测结果可用于临床个体化治疗，预测酪氨酸激酶（ALK）抑制剂治疗的有效性，便于临床用药选择，显著提高治疗效果，使患者最大程度受益；同时，还可以避免不合理用药造成的病人医疗费用负担及社会医疗资源浪费，减少不必要的时效损失以及经济损失。 | ||
| 搜索关键词： | 亚型 荧光定量PCR 人外周血 检测 亚型特异性引物 阳性质粒标准品 医疗费用负担 肿瘤细胞检测 个体化治疗 酪氨酸激酶 抑制剂治疗 合理用药 检测结果 经济损失 临床用药 社会医疗 时效损失 荧光信号 治疗效果 差减法 富集 可用 水解 搜集 预测 | ||
【主权项】：
1.一种从人外周血CTC中检测EML4‑ALK融合基因亚型荧光定量PCR方法，其特征在于包括：1）采用差减法从人外周血中富集CTC；2）设计并获得EML4‑ALK融合基因亚型特异性引物和特异性Taqman探针；3）以EML4‑ALK融合基因亚型阳性质粒标准品为模板进行PCR扩增，并在PCR过程中搜索Taqman探针水解产生的特异荧光信号，来检测EML4‑ALK融合基因亚型的表达；所述EML4‑ALK融合基因亚型包括1、2、3a、3b、4、5a、5b、6、7；所述EML4‑ALK融合基因亚型特异性Taqman探针5’端标记FAM荧光基团，3’端标记TAMRA荧光基团；所述EML4‑ALK融合基因亚型1、2、3a、3b、4、5a、5b、6、7对应的Taqman探针依次为序列表中1至9。
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