[发明专利]一种胎鼠内皮祖细胞的提取分离培养方法有效
| 申请号： | 201810147120.2 | 申请日： | 2018-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN108060116B | 公开（公告）日： | 2020-03-10 |
| 发明（设计）人： | 计晓娟;赵晓东;何灿粲;李亚男;朱旭;杨海燕;龚婷;李丽玲;曹丽娜 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学附属儿童医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 重庆乐泰知识产权代理事务所(普通合伙) 50221 | 代理人： | 刘佳 |
| 地址： | 400014 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种胎鼠肺来源内皮祖细胞的分离培养方法，包括将孕鼠的受孕子宫放入青霉素和链霉素双抗的预冷PBS中浸泡，取出胎鼠放入度青霉素和链霉素双抗的预冷PBS的平皿中，洗涤；取出肺组织放入PBS并破碎，用0.25％胰酶消化步骤以上中的破碎组织，用含10％FBS的DMEM培养基培养，离心分离，取其沉淀，用含生长因子和2％FBS的血清的EBM‑2培养基悬起，以10 |
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| 搜索关键词： | 一种 内皮 细胞 提取 分离 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种胎鼠肺来源内皮祖细胞的分离培养方法，包括以下步骤：(1)取胎鼠的肺脏，放入含有500U-1000U青霉素和链霉素双抗的预冷PBS中，并将肺组织破碎；(2)用胰酶消化步骤(1)中的破碎组织；(3)消化完后，用含FBS的DMEM培养基培养15-18小时；(4)然后取出非贴壁的细胞，离心，取其沉淀；(5)将步骤(4)的沉淀用含生长因子和FBS的血清的EBM-2培养基悬起，接种于孔板中，置于恒温培养箱中培养；(6)每2-4天换一次液，当原代细胞生长融合达80-90％时，用胰酶消化传代培养，持续传代直至细胞呈现均一形态即完成培养。
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