[发明专利]UHPLC-QQQ-MS/MS同时测定酸枣仁水煎液中6种化学成分含量的方法

摘要

本发明涉及一种采用UHPLC‑QQQ‑MS/MS技术同时测定酸枣仁水煎液中6种化学成分含量的方法，属于中药成分分析领域。本发明所建立同时测定酸枣仁水煎液中6种化学成分含量的分析方法专属性强、快速、灵敏且准确可靠，在完成含量测定的同时能够准确给出化合物质量数信息以达到成分鉴定的效果，该方法可为酸枣仁临床应用与质量控制提供技术支持。

主权项

1.一种使用UHPLC‑QQQ‑MS/MS同时测定酸枣仁水煎液中6种化学成分含量的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)混合对照品溶液的配制：分别精密称取斯皮诺素、6”'‑阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、山茶苷B、白桦脂酸对照品适量，加入甲醇溶解并稀释，摇匀，得到浓度分别为6.312μg/ml、5.885μg/ml、0.991μg/ml、0.668μg/ml、0.640μg/ml、4.504μg/ml的混合对照品溶液；(2)供试品溶液的配制：按照酸枣仁临床应用经验，精密称取酸枣仁10g，加10倍水于煎药锅中，浸泡30min，武火煮沸后，保持微沸状态煎煮1h，用4层纱布滤出药液；药渣再加8倍水于煎药锅中，用武火煮沸后，保持微沸状态煎煮1h，用4层纱布滤出药液，合并两次煎煮液，加水适量定容至200ml，得酸枣仁水煎液样品；精密移取酸枣仁水煎液样品0.2ml置5ml量瓶中，加入甲醇定容至5ml，超声10min，放冷，取上层溶液适量，12000r/min离心10min，吸取上清液作为供试品溶液；(3)测定法：采用UHPLC‑QQQ‑MS/MS法测定混合对照品及供试品溶液中6种化学成分的浓度；色谱条件：色谱柱为Agilent C18，2.1mm×100mm,1.8μm，反相色谱柱，A水‑B乙腈作为流动相进行梯度洗脱，洗脱程序为：0‑1.2min，乙腈的体积分数从5％线性增加至31％，1.2‑2.5min，乙腈的体积分数从31％线性增加至95％，2.5‑4.5min，乙腈的体积分数从95％线性增加至100％，4.5‑5min，乙腈的体积分数保持在100％。流速：0.3ml/min；柱温40℃，进样量：1μl；质谱条件：采用ESI‑模式进行检测，扫描方式采用多反应监测模式MRM；参数如下：离子源温度550℃；雾化气55psi；辅助加热气55psi；气帘气35psi；氮气作为喷雾辅助气体；各成分中斯皮诺素、6”'‑阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、山茶苷B、白桦脂酸的质谱参数Q1/Q3分别为：607.5/427.1、783.2/427.4、1205.9/1073.9、1043.6/911.5、725.2/284.0、455.3/455.3；去簇电压DP分别为‑26.46V、‑25.83V、‑60.00V、‑27.20V、‑23.72V、‑97.00V；碰撞能量CE分别为：‑41.60V、‑50.92V、‑60.00V、‑49.77V、‑53.07V、‑20.00V。