[发明专利]UHPLC-QQQ-MS/MS同时测定酸枣仁水煎液中6种化学成分含量的方法

权利要求书

1.一种使用UHPLC-QQQ-MS/MS同时测定酸枣仁水煎液中6种化学成分含量的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)混合对照品溶液的配制：

分别精密称取斯皮诺素、6”’-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、山茶苷B、白桦脂酸对照品适量，加入甲醇溶解并稀释，摇匀，得到浓度分别为6.312μg/ml、5.885μg/ml、0.991μg/ml、0.668μg/ml、0.640μg/ml、4.504μg/ml的混合对照品溶液；

(2)供试品溶液的配制：

精密称取酸枣仁10g，加10倍水于煎药锅中，浸泡30min，武火煮沸后，保持微沸状态煎煮1h，用4层纱布滤出药液；药渣再加8倍水于煎药锅中，用武火煮沸后，保持微沸状态煎煮1h，用4层纱布滤出药液，合并两次煎煮液，加水适量定容至200ml，得酸枣仁水煎液样品；

精密移取酸枣仁水煎液样品0.2ml置5ml量瓶中，加入甲醇定容至5ml，超声10min，放冷，取上层溶液适量，12000r/min离心10min，吸取上清液作为供试品溶液；

(3)测定法：

采用UHPLC-QQQ-MS/MS法测定混合对照品及供试品溶液中6种化学成分的浓度：

色谱条件：色谱柱为Agilent C₁₈，规格为：2.1mm×100mm,1.8μm，反相色谱柱，流动性A为水，流动性B为乙腈，进行梯度洗脱，洗脱程序为：0-1.2min，乙腈的体积分数从5％线性增加至31％，1.2-2.5min，乙腈的体积分数从31％线性增加至95％，2.5-4.5min，乙腈的体积分数从95％线性增加至100％，4.5-5min，乙腈的体积分数保持在100％；流速：0.3ml/min；柱温40℃，进样量：1μl；

质谱条件：采用ESI^-模式进行检测，扫描方式采用多反应监测模式(MRM)，参数如下：离子源温度550℃；雾化气55psi；辅助加热气55psi；气帘气35psi；氮气作为喷雾辅助气体，各成分斯皮诺素、6”’-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、山茶苷B、白桦脂酸的质谱参数Q1/Q3(m/z)分别为：607.5/427.1、783.2/427.4、1205.9/1073.9、1043.6/911.5、725.2/284.0、455.3/455.3；去簇电压(DP)分别为-26.46V、-25.83V、-60.00V、-27.20V、-23.72V、-97.00V；碰撞能量(CE)分别为：-41.60V、-50.92V、-60.00V、-49.77V、-53.07V、-20.00V。