[发明专利]一种检测FLT3-D835基因的试剂盒与应用有效
| 申请号： | 201810065764.7 | 申请日： | 2018-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN108410981B | 公开（公告）日： | 2021-05-25 |
| 发明（设计）人： | 於然;刘明坤;叶锋 | 申请（专利权）人： | 北京旌准医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100176 北京经济技*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种检测FLT3‑D835基因的试剂盒，包括：针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的正向引物、针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的反向引物、PCR反应液Mix、纯水、EcoRV内切核酸酶及内切核酸酶缓冲液；相较于传统的D835酶切方法，本发明在自行设计引物的基础上，通过设计和调整酶切反应体系中酶活力单位与扩增产物的比例，可以提高内切酶对特异性序列的识别度；通过将酶切产物进行适当的预处理，可以降低检出结果模棱两可的现象。通过本发明所提供的在D835酶切过程中进行适当设计和改进，可以有效降低甚至消除D835野生型序列的阳性检出率，并且使检出结果更加明晰，同时为临床标本检测时常出现的假阳性问题和结果不明问题提供了解决方案。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 flt3 d835 基因 试剂盒 应用 | ||
【主权项】：
1.一种检测FLT3‑D835基因的试剂盒，其特征在于：包括：针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的正向引物、针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计的反向引物、PCR反应液Mix、纯水、EcoRV内切核酸酶及内切核酸酶缓冲液；所述针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计正向引物的核苷酸序列如SEQ.ID.No1：5’‑CAGGAAACAGCTATGACCAGGAACGTGCTTGTCACCC‑3’所述针对EcoRV内切核酸酶识别位点GATATC设计反向引物的核苷酸序列如SEQ.ID.No2：5’‑ACGACGGCCAGTGATATCATAGCAGCCTCACATTGCCC‑3’；经EcoRV内切核酸酶识别位点的正向引物SEQ.ID.No1和反向引物SEQ.ID.No2PCR扩增后的D835扩增产物用于设计酶切反应体系进行酶切反应，酶切产物经处理过程预处理后用于电泳检测。
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