[发明专利]一种磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒及应用在审
| 申请号： | 201810061626.1 | 申请日： | 2018-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN108220284A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 赵大显;简少卿;张翠真;陈志和;毛振方;程海燕;陈娟 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 一种磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒及应用，属于分子生物学技术领域。该试剂盒包括以下六种组分：磁珠悬液A、缓冲液B、缓冲液C、缓冲液D、缓冲液E和洗脱液。该试剂盒提取方法包括以下四个步骤：细菌裂解、磁珠吸附、洗涤、洗脱。本发明试剂盒采用单分散、超顺磁性硅羟基纳米磁珠，配合独特的缓冲液系统，提取出来的细菌基因组DNA浓度大、纯度高、完整性好。 | ||
| 搜索关键词： | 缓冲液 细菌基因组DNA提取试剂盒 磁珠法 试剂盒 分子生物学技术 细菌基因组DNA 缓冲液系统 超顺磁性 磁珠吸附 发明试剂 纳米磁珠 细菌裂解 单分散 硅羟基 洗脱液 磁珠 洗脱 悬液 洗涤 应用 配合 | ||
【主权项】：
1.一种磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒，其特征是包括磁珠悬液A、缓冲液B、缓冲液C、缓冲液D、缓冲液E、洗脱液六种组分；所述磁珠悬液A中使用的磁珠为单分散、超顺磁性硅羟基纳米磁珠，磁珠粒径300‑500nm，浓度100mg/mL，磁珠悬浮在20%的乙醇中；所述缓冲液B终浓度组成为：2‑5mol/L盐酸胍、1‑2%月桂酰肌氨酸钠、200‑500µg/mL核糖核酸酶A、0.05‑0.1mol/L柠檬酸钠，溶剂为无菌去离子水，缓冲液B pH为6.5‑8.0；所述缓冲液C终浓度组成为：1‑2mol/L异硫氰酸胍、60‑80%异丙醇、1‑5%聚乙二醇、0.02‑0.05mol/L柠檬酸钠，溶剂为无菌去离子水，缓冲液C pH为5.5‑7.5；所述缓冲液D终浓度组成为：1‑2mol/L醋酸钠、5‑8%聚乙二醇，溶剂为无菌去离子水，缓冲液D pH为5.0‑6.0；所述缓冲液E终浓度组成为：0.05‑0.1mol/L氯化钠、60‑80%乙醇、10mmol/L三羟甲基氨基甲烷，溶剂为无菌去离子水，缓冲液D pH为7.0‑7.5；所述洗脱液为：无菌去离子水或10mmol/L三羟甲基氨基甲烷，洗脱液pH为7.0‑8.0。
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