[发明专利]基于DNA条形码的长毛明对虾和凡纳滨对虾的鉴定方法在审
| 申请号： | 201810009030.7 | 申请日： | 2018-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN108220455A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 王攀攀;金烨楠;易啸;王军;苏永全;毛勇 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 基于DNA条形码的长毛明对虾和凡纳滨对虾的鉴定方法，根据长毛明对虾和凡纳滨对虾线粒体基因组全序列，设计扩增细胞色素C氧化酶I(COI)基因片段的引物COIF和COIR；提取长毛明对虾和凡纳滨对虾的基因组DNA，利用引物COIF和COIR进行PCR反应；将PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测，测序验证；利用MEGA7.0比对获得的序列，利用DNAMAN预测各种对虾代表序列的酶切位点；取待放流的长毛明对虾F1代仔虾和亲虾，提取基因组DNA；利用COIF和COIR，对DNA模板F1～F4，P1～P4，V1，V2，Y1，Y2，V1+Y1，V2+Y2进行PCR扩增，将PCR扩增产物酶切，酶切产物进行电泳鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 对虾 凡纳滨对虾 引物 琼脂糖凝胶电泳检测 提取基因组DNA 线粒体基因组 基因组DNA 细胞色素C 电泳鉴定 基因片段 酶切产物 酶切位点 全序列 氧化酶 比对 测序 扩增 酶切 仔虾 验证 预测 | ||
【主权项】：
1.基于DNA条形码的长毛明对虾和凡纳滨对虾的鉴定方法，其特征在于包括以下步骤：1)根据长毛明对虾(NC_026885.1)和凡纳滨对虾(NC_009626.1)线粒体基因组全序列，设计扩增细胞色素C氧化酶I(COI)基因片段的引物COIF和COIR；2)提取长毛明对虾和凡纳滨对虾的基因组DNA，利用引物COIF和COIR进行PCR反应；3)将步骤2)中获得的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，并测序验证；4)利用MEGA7.0比对获得的序列，同时利用DNAMAN(Version9.0)预测各种对虾代表序列的酶切位点；5)取待放流的长毛明对虾F1代仔虾和亲虾，分别提取基因组DNA；6)利用COIF和COIR，对DNA模板F1～F4，P1～P4，V1，V2，Y1，Y2，V1+Y1(1︰1)，V2+Y2(1︰1)进行PCR扩增，再将所述的PCR扩增产物进行酶切，酶切产物进行电泳鉴定。
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