[发明专利]用于环状共有序列测序的单链环状DNA文库有效

专利信息
申请号: 201780078583.1 申请日: 2017-12-15
公开(公告)号: CN110062809B 公开(公告)日: 2023-05-05
发明(设计)人: T.盖图什;R.陈;A.理查森 申请(专利权)人: 豪夫迈·罗氏有限公司
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;C12Q1/6855
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 甘霖;黄希贵
地址: 瑞士*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 发明是一种通过利用环状捕获分子生成环状单链核酸分子的文库的新型方法。该方法不受靶核酸分子大小限制,并且可以潜在地容纳非常长的分子。该方法可应用于核酸测序,例如纳米孔测序,其中可读取无限长度的模板。
搜索关键词: 用于 环状 共有 序列 链环 dna 文库
【主权项】:
1.从包含多种双链靶核酸分子的样品制备环状单链靶核酸分子的文库的方法,所述方法包括:a.将衔接子连接至所述双链靶分子的每个末端,由此形成衔接子‑连接的双链分子;b.使所述衔接子‑连接的双链分子变性,由此形成衔接子‑连接的分子的两条链;c.使捕获分子退火至所述衔接子‑连接的分子的每条链,由此形成包含与在所述衔接子‑连接的分子的链的5'‑末端和3'‑末端的衔接子序列杂交的捕获分子的杂合分子,其中所述捕获分子是环状单链核酸分子,其包含与所述衔接子的至少一部分互补的两个序列;d.延伸所述衔接子‑连接的分子的链的3'‑末端,以到达所述衔接子‑连接的分子的链的5'‑末端;e.连接所述衔接子‑连接的分子的链的5'‑末端和3'‑末端,由此形成包含所述捕获分子和所述衔接子‑连接的分子的环化链的杂合分子;和f.将所述捕获分子与所述衔接子‑连接的分子的环化链分离,由此形成环状单链靶核酸分子的文库。
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