[发明专利]通过质谱法测定BRAF突变和野生型BRAF蛋白的方法有效
| 申请号： | 201780078506.6 | 申请日： | 2017-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN110291403B | 公开（公告）日： | 2022-09-16 |
| 发明（设计）人： | G·马尔科-瓦尔加;C·韦林德;Y·杉原 | 申请（专利权）人： | 特里特福尔莱弗公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京汇知杰知识产权代理有限公司 11587 | 代理人： | 杨巍;蔡伦 |
| 地址： | 瑞典*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于测定生物样品中野生型(WT)BRAF蛋白与其蛋白变体之间的摩尔比的方法，其包括以下步骤：a)通过使用丝氨酸蛋白酶消化所述样品，所述丝氨酸蛋白酶特异性地将肽键C‑端切割成谷氨酸残基或将肽键C‑端切割成谷氨酸或天冬氨酸残基，以获得包含由所述蛋白酶消化所述肽产生的肽片段的组合物，其中所述片段的质量在所述野生型(WT)B‑raf蛋白与一种所述BRAF蛋白变体之间不同。b)使用质谱技术定量测定消化野生型(WT)B‑raf蛋白产生的所述肽片段的摩尔量和消化野生型(WT)B‑raf蛋白的变体产生的所述肽片段的摩尔量。以及，c)基于所述定量评估，计算所述WT BRAF蛋白与其所述变体之间的至少一个具体比值。此外，公开了一种用于评估受试者对BRAF相关疾病的给定药物治疗的敏感性的方法。另外，公开了一种治疗患有BRAF相关疾病的受试者的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 通过 质谱法 测定 braf 突变 野生型 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
1.用于测定生物样品中野生型(WT)BRAF蛋白与其蛋白变体之间的摩尔比的方法，包括以下步骤：a)通过使用丝氨酸蛋白酶消化所述样品，所述丝氨酸蛋白酶特异性地将肽键C‑端切割成谷氨酸残基或将肽键C‑端切割成谷氨酸或天冬氨酸残基，以获得包含通过所述蛋白酶消化所述肽产生的肽片段的组合物，其中所述片段的质量在所述野生型(WT)B‑raf蛋白与BRAF蛋白变体之间不同；b)使用质谱技术定量测定消化野生型(WT)B‑raf蛋白产生的肽片段的摩尔量和消化所述野生型(WT)B‑raf蛋白的变体产生的肽片段的摩尔量；以及c)基于定量评估，计算所述WT BRAF蛋白与其变体之间的至少一个具体比值。
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