[发明专利]一种基于纤突蛋白F的检测血清8型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于F蛋白的检测血清8型禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒，包括包被有血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F的表达蛋白的ELISA酶标板，阳性、阴性对照，HRP标记的兔抗鸡二抗，稀释液、显色液、洗涤液、终止液。本发明的ELISA试剂盒能特异性的检测出FAdV‑8抗体，而与抗流感病毒血清、抗马立克病毒血清、抗新城疫病毒血清、抗鸡传染性贫血病病毒血清、网状内皮细胞增生病病毒、抗血清4型禽腺病毒血清、抗减蛋综合征病毒血清以及SPF鸡血清不反应。因此，该试剂盒具有良好FAdV‑8的特异性，能用于FAdV‑8感染及免疫状况流行病学调查。

主权项

1.一种血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F的表达蛋白，其特征在于所述表达蛋白的制备方法包括如下步骤：（1）利用重组酶ExnaseTM II将pGEX-6p-1线性化载体与血清8型禽腺病毒F基因的PCR产物进行重组克隆，重组克隆经序列验证后，命名为pGEX-6p-1-F，挑取阳性克隆进行质粒制备，并进行PCR鉴定；（2）将步骤（1）中PCR鉴定的阳性克隆转化到BL21细胞中，并将菌液以1：100体积比接种于加AMP的LB培养基中，250rpm摇3h后，加入IPTG于16℃下进行诱导表达过夜，收集细菌，用PBS重悬后，超声破碎，离心分上清和沉淀；（3）将步骤（2）中得到的上清经GST亲和层析柱纯化后得到所述血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F的表达蛋白。