[发明专利]一种提高脐带来源间充质干细胞原代细胞产量的制备方法有效
申请号: | 201711365354.6 | 申请日: | 2017-12-18 |
公开(公告)号: | CN108220229B | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
发明(设计)人: | 刘永进;秦森邦;古筝;赖春宁 | 申请(专利权)人: | 北京康亿瑞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;王璐 |
地址: | 100070 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及细胞培养与细胞分离技术领域,具体公开了一种提高脐带来源间充质干细胞原代细胞产量的制备方法。在传统华通氏胶组织块一次性贴壁培养分离间充质干细胞的基础上,在培养后期不同时间精细地收集华通氏胶组织块并重复贴壁,可在不同的时间连续收集P0代间充质干细胞,该方法通过间充质干细胞不断从华通氏胶组织中游离出生长的特性,使得华通氏胶的利用率实现最大化,与华通氏胶组织块一次性贴壁培养相比,P0代间充质干细胞的获取数量可至少增加2倍,后续通过控制间充质干细胞的培养密度、培养基中血清替代物浓度和培养时间,细胞传代培养至P3代时,所获得细胞数量可完全满足细胞储存和临床移植的需要。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 脐带 来源 间充质 干细胞 细胞 产量 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种提高脐带来源间充质干细胞原代细胞产量的方法,其特征在于,将脐带华通氏胶剪碎至1~3mm3大小组织块,将组织块转移至细胞培养皿中平铺贴壁;在间充质干细胞从华通氏胶组织块中游离出的过程中,分阶段收集华通氏胶组织块,将所收集的华通氏胶组织块进行二次贴壁培养;在二次贴壁培养过程中,再次分阶段收集华通氏胶组织块,进行再次贴壁培养,以此类推,直至无法收集到可用于贴壁培养的华通氏胶组织块;收集各次贴壁培养中游离出的原代间充质干细胞,即得脐带来源间充质干细胞原代细胞。
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