[发明专利]猪流行性腹泻病毒的实时荧光RT-PCR检测方法及试剂盒在审
申请号: | 201711353125.2 | 申请日: | 2017-12-15 |
公开(公告)号: | CN108441579A | 公开(公告)日: | 2018-08-24 |
发明(设计)人: | 艾青;杨健 | 申请(专利权)人: | 广州市瑞品生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 511430 广东省广州市番禺区大*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测猪流行性腹泻病毒的实时荧光RT‑PCR引物和探针及试剂盒,所述PCR引物的上下游引物序列依次如SEQ ID NO:1~2所示,探针序列如SEQ ID NO:3所示;本发明方法能特异检测PEDV病毒,与TGEV、RV等其他14种常见猪病原、猪基因组核酸以及传代细胞核酸均无交叉反应;检测低限可达0.39copy/μL克隆基因拷贝或2fg/μL病毒核酸,且重复性非常好。对119份猪临床样品的检测试验显示,本发明荧光RT‑PCR方法临床检测高效可靠;采用135份样品进行的方法准确性评估试验结果显示,该法检测真阳性率为100%,真阴性率为100%,说明本发明方法准确可靠,具有较大的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 检测 猪流行性腹泻病毒 试剂盒 核酸 实时荧光RT-PCR 病原 准确性评估 病毒核酸 传代细胞 高效可靠 检测低限 交叉反应 克隆基因 临床检测 临床样品 实时荧光 探针序列 引物序列 猪基因组 真阳性 真阴性 荧光 拷贝 探针 病毒 试验 应用 | ||
【主权项】:
1.一种用于检测猪流行性腹泻病毒的荧光RT‑PCR引物和探针,其特征在于,所述PCR引物的上下游引物序列依次如SEQ ID NO:1~2所示,探针序列如SEQ ID NO:3所示,探针5’端标记荧光基团、3’端标记淬灭基团。
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