[发明专利]利用悬浮培养的地黄茎形成层干细胞生产梓醇的方法

摘要

本发明公开了一种利用悬浮培养的地黄茎形成层干细胞生产梓醇的方法，具体包括：以地黄属植物茎为外植体，通过诱导培养、分离培养和继代培养建立稳定生长的地黄形成层干细胞培养体系；然后于生物反应器中加入联合诱导子β‑CD和茉莉酸甲酯进行悬浮培养，之后经超声提取、大孔树脂吸附、高效液相制备柱进行精制后得到高纯度的梓醇。本发明利用的植物干细胞培养体系具有同步生长、遗传性状稳定、生长速度快、梓醇合成稳定等优良特性，其作为制备梓醇的原料，为梓醇的制备提供了一种新方法；此外，与化学合成相比，本发明利用生物反应器培养技术结合植物干细胞培养技术生产高纯度梓醇，具有生产周期短，安全性高，成本低，产量高，低污染等优点。

主权项

1.一种利用悬浮培养的地黄茎形成层干细胞生产梓醇的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：S1：以地黄属植物茎为外植体，对外植体进行灭菌，通过诱导培养、分离培养和继代培养建立稳定生长的地黄茎形成层干细胞培养体系；S2：将地黄形成层干细胞培养体系于生物反应器中进行悬浮培养，向悬浮培养基中加入联合诱导子β-CD和茉莉酸甲酯刺激梓醇的累积；S3：收集经S2悬浮培养的培养物，进行冷冻干燥，得到冻干粉，采用70～95％的乙醇溶液对所述冻干粉进行超声提取数次，过滤并合并提取液后于低温减压浓缩得浸膏I；S4：将S3所得浸膏I用适量无水乙醇溶解后，形成粗提液，对粗提液进行大孔树脂吸附，然后用不同浓度的乙醇进行梯度洗脱，合并洗脱液后低温减压浓缩得浸膏II；S5：采用高效液相制备柱对S4所得浸膏II进行精制得到高纯度的梓醇。