[发明专利]一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的方法在审
| 申请号： | 201711145752.7 | 申请日： | 2017-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN107881189A | 公开（公告）日： | 2018-04-06 |
| 发明（设计）人： | 林建群;高雪彦;陈林旭;林建强;刘相梅;庞昕;王瑞 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250061 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的方法，是以如下方式实现(1)构建重组菌A.ferrooxidans(pJRD215‑taq‑afeI)，实现增加酰基高丝氨酸内酯合成酶基因(afeI)的拷贝数，通过过表达afeI基因增加酰基高丝氨酸内酯(AHL)的含量，达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力；或(2)在野生型A.ferrooxidans培养过程中，添加5.4×10‑3～10×10‑3mg/mL量外源的酰基高丝氨酸内酯(AHL)，通过增加AHL含量达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力。本发明提供的提高氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的策略在提高生物冶金工业浸矿效率上具有广阔的开发前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 有效 提高 酸性 氧化 亚铁 杆菌 能力 方法 | ||
【主权项】：
一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的方法，其特征在于，以如下方式实现：(1)构建重组菌A.ferrooxidans(pJRD215‑taq‑afeI)，实现增加酰基高丝氨酸内酯合成酶基因(afeI)的拷贝数，通过过表达afeI基因增加酰基高丝氨酸内酯(AHL)的含量，达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力；其中，构建重组菌A.ferrooxidans(pJRD215‑taq‑afeI)的方法是：利用分子克隆技术，将taq启动子与afeI片段融合获得大小为716bp的taq‑afeI，并与表达质粒pJRD215连接构建形成重组质粒载体pJRD215‑taq‑afeI，然后转化大肠杆菌SM10，并以含有重组质粒的大肠杆菌SM10为供体菌，以野生型A.ferrooxidans为受体菌，通过接合转移的方式将重组质粒转移进入A.ferrooxidans，获得afeI基因拷贝数增多的重组菌A.ferrooxidans(pJRD215‑taq‑afeI)；上述重组菌构建所用引物为：Taq sen：TTTCCCAAGCTTGAATTCCGGCTCTAGACGACATCATAACGGTTCTGGTaq ant：GAATTTGTTTCCTGTGTGAAATTGAfeI sen：TTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAAATTCATGCAGGTTATAACCGGGAfeI ant：ATTTCTAGCTAGCCGGGATCCTTAGTCCAGATCTATCCA；或(2)在野生型A.ferrooxidans培养过程中，添加外源的酰基高丝氨酸内酯(AHL)，通过增加AHL含量达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力；其中，所述外源的酰基高丝氨酸内酯添加时期为A.ferrooxidans培养初期，其添加量为5.4×10‑3～10×10‑3mg/mL。
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