[发明专利]一种微量降解基因组DNA甲基化建库测序方法及其试剂盒有效
| 申请号： | 201711110244.5 | 申请日： | 2017-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN107858409B | 公开（公告）日： | 2021-05-04 |
| 发明（设计）人： | 王君文;黄文蕊;吴炜;吉冠玉;高飞 | 申请（专利权）人： | 深圳市易基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市坪山新区坪*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种微量降解基因组DNA甲基化建库测序方法，本发明通过测试不同建库技术，优化反应流程，建立了一种可以检测低至1ng严重降解基因组DNA的甲基化建库技术。通过测试不同酶组合，实现了降解DNA的末端修复、3端加A和DNA双链由于降解形成缺口的修复，在同一反应体系中完成；通过优化反应体系，实现在原反应液中连接测序接头；进一步测试接头生物素标记后，通过生物素和链霉素磁珠的特异性结合，实现后续亚硫酸盐处理前已连接接头基因组片段的钓取，减少目的片段的丢失；此外还优化建立亚硫酸盐反应体系和反应时间，降低处理过程中DNA的损伤，保证甲基化转换率，实现微量降解样本的甲基化建库和测序。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微量 降解 基因组 dna 甲基化 建库测序 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
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