[发明专利]检测肿瘤标志物负载分子筛电化学免疫传感器的制备方法

摘要

本发明提供检测肿瘤标志物负载分子筛电化学免疫传感器的制备方法，包括以下步骤将玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨，超纯水清洗干净；取哌嗪修饰的氨基化石墨烯的壳聚糖溶液滴加到电极表面，冲洗晾干；滴加1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺EDC和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS溶液至电极表面；在工作电极表面先滴涂银纳米粒子对苯硫酚功能化磺化碳纳米管检测抗体Ab2孵化物溶液；再滴加SAPO‑34‑Pd/Co‑Ab2二抗孵化物溶液，从而制得一种用于检测肿瘤标志物负载分子筛电化学免疫传感器。本发明中所采用得哌嗪修饰的氨基化石墨烯保留了石墨烯较大的表面积和较好的导电性，以及良好的生物相容性和稳定性。

主权项

检测肿瘤标志物负载分子筛电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)、将直径为4mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨，超纯水清洗干净；取8μL、1.5～2.5mg/mL的哌嗪修饰的氨基化石墨烯的壳聚糖溶液滴加到电极表面，室温下晾干，用超纯水冲洗电极表面，晾干；滴加8μL、浓度为0.8～1.0mol/L的1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺EDC和0.3～0.4mol/LN‑羟基琥珀酰亚胺NHS溶液至电极表面，4℃冰箱中孵化40min，室温下晾干；步骤(2)、在步骤(1)修饰的工作电极表面滴加8μL、10～12μg/mL的肿瘤标志物一抗，超纯水冲洗电极表面，4℃冰箱中晾干；步骤(3)、在步骤(2)修饰的工作电极表面滴加8μL、质量分数为2～4％的BSA溶液，封闭电极表面上非特异性活性位点，超纯水冲洗电极表面，4℃冰箱中晾干；步骤(4)、在步骤(3)修饰的工作电极表面滴加8μL、质量分数为3～3.5％的牛血清白蛋白BSA溶液于电极表面，以封闭电极表面上非特异性活性位点，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；滴加8μL、10～100ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原Ag溶液，超纯水冲洗电极表面，4℃冰箱中干燥；步骤(5)、在步骤(4)修饰的工作电极表面先滴涂8μL、2～4mg/mL的银纳米粒子对苯硫酚功能化磺化碳纳米管检测抗体Ab2孵化物溶液，滴涂于电极表面，置于4℃冰箱中晾干；再滴加8μLSAPO‑34‑Pd/Co‑Ab2二抗孵化物溶液，置于4℃冰箱中晾干，制得一种用于检测肿瘤标志物负载分子筛电化学免疫传感器。