[发明专利]基于反向荧光增强的高灵敏可视化双模态急性心肌梗塞免疫层析试纸条制备和检测方法

摘要

基于反向荧光增强的高灵敏可视化双模态急性心肌梗塞免疫层析试纸条制备和检测方法。本发明利用磁纳米颗粒在特定条件下可以淬灭荧光信号的反应机理，结合超顺磁性纳米颗粒免疫层析试纸条检测结果可视化及荧光检测灵敏度高的优势，拟构建一种可视化的荧光定量检测免疫层析试纸条，通过对淬灭荧光信号的反应机理，消除背景荧光的干扰，并通过荧光的信号强度及磁纳米颗粒的聚集显色，达到裸眼条件下快速定性，暗场测试下精准定量的宽范围双模态检测，搭建一种基于反向荧光增强高灵敏可视化双模态免疫层析试纸条检测技术，该方法操作简单，无需专业培训，方便快捷，结果直观，其快速高灵敏检测可实现AMI早期诊断的准确性及社区筛查的普适性。

主权项

基于反向荧光增强的高灵敏可视化双模态急性心肌梗塞免疫层析试纸条制备方法，其特征步骤如下：1)磁纳米颗粒免疫探针的制备：将高分子(2，5‑呋喃二酮与1‑十八烯的聚合物)改性后的水溶性磁纳米颗粒，急性心肌梗塞的相关标志物的标记抗体cTnI，EDC(1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)溶解于反应溶液，室温悬培，活化磁纳米颗粒表面的羧基，离心，洗涤，最后偶联上抗体的磁纳米颗粒用BSA封闭过夜；2)试纸条的组装：本发明的试纸条依次是由样品垫，表面涂有急性心肌梗塞特异性单克隆抗体标记的磁纳米颗粒的结合垫，在硝酸纤维素膜的特定区域喷有用荧光素Cy5标记的cTnI包被抗体即检测线，喷有IgG抗体的区域即质控线，末端的吸水垫以及塑料底板构成。