[发明专利]一种基于生物传感器的高通量筛选方法有效
| 申请号： | 201710973957.8 | 申请日： | 2017-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN109679886B | 公开（公告）日： | 2022-05-10 |
| 发明（设计）人： | 涂然;李梁坡;王钦宏;马延和 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N13/00;C12P7/42;G01N21/64;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 苏宇欢 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于生物传感器的高通量筛选方法，属于高通量筛选技术领域。本发明通过采用液滴包埋含生物传感器细胞方式，对代谢物小分子3‑脱氢莽草酸细胞工厂进行高通量筛选，实现了3‑脱氢莽草酸高产菌株的高效富集，相比生物传感器结合流式细胞仪的单细胞水平筛选方法，本发明一方面利用液滴内细胞可扩增富集特性，将单细胞间荧光信号差异扩大N倍至细胞群体间差异；另一方面，利用液滴隔离单细胞及其分泌产物的特性，排除其他细胞及分泌产物影响，还原细胞与其分泌至胞外代谢物真实交流反馈；通过以上改进有效提高了有益阳性克隆菌株的筛选灵敏性，提高了有益阳性克隆菌株的富集效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 生物 传感器 通量 筛选 方法 | ||
【主权项】：
1.一种产代谢物小分子化合物细胞工厂的高通量筛选方法，所述方法包括以下步骤(I)‑(V)：(I)构建应答代谢物小分子化合物的基因型生物传感器；(II)构建含有步骤(I)所述基因型生物传感器的产目标代谢物小分子化合物的细胞工厂；(III)利用诱变技术对步骤(II)所述细胞工厂进行诱变，建立突变库；(IV)采用微液滴对步骤(III)中所建立的突变库进行单细胞包埋、培养；(V)对步骤(IV)所述的包含单细胞的微液滴进行高通量筛选。
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