[发明专利]一种基于生物传感器的高通量筛选方法有效
| 申请号： | 201710973957.8 | 申请日： | 2017-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN109679886B | 公开（公告）日： | 2022-05-10 |
| 发明（设计）人： | 涂然;李梁坡;王钦宏;马延和 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N13/00;C12P7/42;G01N21/64;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 苏宇欢 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 生物 传感器 通量 筛选 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种产代谢物小分子化合物细胞工厂的高通量筛选方法，依次包括以下步骤：
(Ⅰ)构建应答代谢物小分子化合物的基因型传感器，所述代谢物小分子化合物为芳香族化合物3-脱氢莽草酸；所述应答代谢物小分子化合物的基因型传感器由调控基因cusR的启动子和调控基因cusR、连接序列、荧光蛋白报告基因顺序构成，所述调控基因cusR的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示的多核苷酸，所述调控基因cusR启动子的核苷酸序列为SEQ IDNO:2所示的多核苷酸，所述荧光蛋白报告基因为绿色荧光蛋白报告基因；
(Ⅱ)构建含有步骤(Ⅰ)所述应答代谢物小分子化合物的基因型传感器的产目标代谢物小分子化合物的细胞工厂，所述产目标代谢物小分子化合物的细胞工厂为原核细胞大肠杆菌；
(Ⅲ)利用物理诱变常压等离子体诱变技术对步骤(Ⅱ)所述细胞工厂进行诱变，建立突变库；
(Ⅳ)采用油包水或水包油微液滴对步骤(Ⅲ)建立的突变库进行单细胞包埋、培养；
(Ⅴ)对步骤(Ⅳ)所述包含单细胞的油包水或水包油微液滴采用液滴微流控平台进行高通量筛选。
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