[发明专利]一种土茯苓组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种土茯苓组培快繁方法，特征是土茯苓攀援状灌木，根茎块根状，有明显结节，着生多数须根。茎无刺。单叶互生；革质，披针形至椭圆状披针形，先端渐尖，基部圆形，全缘。7~8月开单性花，雌雄异株；伞形花序腋生，花序梗极短；花小，白色。9~10结果，浆果球形，直径6~8毫米，红色，其根茎可入药。根茎于秋季采挖，晒干或趁鲜切片晒干备用。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了土茯苓离体再生植株,建立了土茯苓的离体快速繁殖技术体系，为土茯苓良种快繁和规模生产发展提供了现实保障。

主权项

一种土茯苓组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：（1）诱导培养：采集土茯苓优株根部当年生幼嫩萌芽条,剪取顶部茎段作为外植体,将外植体先用洗洁精浸泡4h，同时用软毛刷刷洗表面的柔毛,再用自来水冲洗6h，茎剪成1.6cm、带3个腋芽的茎段,在超净工作台上，用75%乙醇溶液中消毒35s，再用0.1%升汞浸泡25min，无菌水冲洗9次，接种至诱导培养基中进行不定芽诱,接种后置于每天光照15小时，光照强度为3200lx，置于培养温度为29℃的条件下培养直至形成不定芽;（2）继代培养：将步骤（1）培养后长出的嫩芽从基部剪下并转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在29℃条件下全暗培养4天，然后置于每天光照16小时，光照强度为3200lx，置于培养温度为29℃的条件下培养，每21天继代一次;（3）生根培养：将步骤（1）或（2）的芽苗长至3cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后置于每天光照17小时，光照强度为5100lx，培养温度为29℃的条件下培养至生根;（4）炼苗移栽：将长至5cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖半打开在培养室中炼苗4天后，培养瓶瓶盖全打开在室外于自然光照下炼苗5天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:黄泥土＝1：2混合成的基质中并移栽定植于栽药种地中，移栽2个月保持空气湿度85%以上。