[发明专利]一种土茯苓组培快繁方法

权利要求书

1.一种土茯苓组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）诱导培养：采集土茯苓优株根部当年生幼嫩萌芽条,剪取顶部茎段作为外植体,将外植体先用洗洁精浸泡4h，同时用软毛刷刷洗表面的柔毛,再用自来水冲洗6h，茎剪成1.6cm、带3个腋芽的茎段,在超净工作台上，用75%乙醇溶液中消毒35s，再用0.1%升汞浸泡25min，无菌水冲洗9次，接种至诱导培养基中进行不定芽诱,接种后置于每天光照15小时，光照强度为3200lx，置于培养温度为29℃的条件下培养直至形成不定芽;

（2）继代培养：将步骤（1）培养后长出的嫩芽从基部剪下并转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在29℃条件下全暗培养4天，然后置于每天光照16小时，光照强度为3200lx，置于培养温度为29℃的条件下培养，每21天继代一次;

（3）生根培养：将步骤（1）或（2）的芽苗长至3cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后置于每天光照17小时，光照强度为5100lx，培养温度为29℃的条件下培养至生根;

（4）炼苗移栽：将长至5cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖半打开在培养室中炼苗4天后，培养瓶瓶盖全打开在室外于自然光照下炼苗5天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:黄泥土＝1：2混合成的基质中并移栽定植于栽药种地中，移栽2个月保持空气湿度85%以上。

2.根据权利要求1所述的一种土茯苓组培快繁方法，其特征在于步骤（1）所述的诱导培养基为：MS+8.5mg/L 6-BA+4.5mg/L NAA+31g/L蔗糖+6.5g/L琼脂，pH为5.9。

3.根据权利要求1所述的一种土茯苓组培快繁方法，其特征在于步骤（2）所述的增殖培养基为：MS+1.1mg/L NAA+6.1mg/L 6-BA+31g/L蔗糖+6.1g/L琼脂，pH为5.4～5.9。

4.根据权利要求1所述的一种土茯苓组培快繁方法，其特征在于步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+3.1mg/L IBA+2.1mg/L ABT₁+31g/L蔗糖+6.1g/L琼脂，pH为5.9。