[发明专利]针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法

摘要

本发明涉及针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法，包括：小麦种子表面消毒及育苗；纹枯病菌菌株活化、培养后打取菌碟；将待测药剂配制成系列浓度的稀溶液；将发芽小麦种子分成供试组及对照组；将菌碟套至发芽小麦种子的芽根部，并以灭菌无纺布包裹；将供试组放入稀溶液，将对照组放入自来水，进行吸收；供试组及对照组分别浇溉自来水进行培养，并在培养结束时量病斑长度；经统计、计算得出待测药剂的EC50值。本发明通过无菌无纺布包裹接种纹枯病菌的发芽小麦种子，然后施加药剂，从而在病原菌‑寄主植物‑杀菌剂三者共同存在的环境下评价或筛选防治药剂，更符合田间试验效果，具有更好的参考价值。

主权项

一种针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法，其特征是，包括以下步骤：第一步、取若干小麦种子，对其表面进行消毒并洗涤干净；采用无菌水湿润的滤纸，将小麦种子放在以无菌水湿润的滤纸上，于培养箱中避光培养使小麦种子发芽，当芽长度为0.6‑0.8cm时，取出备用；第二步、取纹枯病菌菌株并接种至新鲜的平板培养基上活化；将活化后的纹枯病菌再接种至新鲜的平板培养基上继续培养，当菌落半径达到平板半径的2/3～3/4时，用打孔器在菌落边缘打取菌碟，备用；所述菌碟为带有纹枯病菌的培养基，且呈环状；第三步、取待测药剂，先配制成预定浓度的母液，再按预定梯度稀释成系列浓度的稀溶液，备用；第四步、将第一步所得的发芽小麦种子分成若干供试组以及一个对照组，各供试组以及对照组中的发芽小麦种子数量相同；所述供试组的数量为第三步所得稀溶液浓度个数的正整数倍，各浓度稀溶液对应的供试组数量相同；第五步、先将第二步所得菌碟分别套至各发芽小麦种子的芽根部，再将同一供试组或同一对照组的发芽小麦种子的芽根部包入或卷入同一灭菌无纺布中，并在灭菌无纺布外绑扎固定；第六步、将各供试组放入盛有对应浓度第三步所得稀溶液的器皿中，将对照组放入盛有自来水的器皿中，放置时间为预定的吸收时间；各器皿与供试组或对照组一一对应；各器皿中稀溶液或自来水的体积相同；各供试组或对照组的发芽小麦种子按芽朝上根朝下的方式放置；第七步、按预定时间间隔向各器皿中分别浇溉等体积的自来水，当达到预定的培养时间时，取出各供试组或对照组的发芽小麦种子，量取其上的病斑长度并记录；第八步、将与同一浓度稀溶液对应的所有供试组中发芽小麦种子的病斑长度统计在一起并计算平均值，作为与该浓度稀溶液对应的检测值；计算对照组中发芽小麦种子的病斑长度平均值，作为对照值；根据检测值和对照值计算各浓度稀溶液的抑制率；根据抑制率按预定函数计算各浓度稀溶液的几率值Y，所述预定函数的作用为根据指定正态分布的概率值、指定平均值以及指定标准偏差返回正态累积分布函数的反函数值，其中，以抑制率为指定正态分布的概率值，指定平均值为属于实数的预设常数，指定标准偏差为大于零且属于实数的预设常数；按各稀溶液的浓度计算对数浓度值X；先采用回归法算得对数浓度值X与几率值Y的线性回归方程，再根据该线性回归方程算得待测药剂的EC50值；测定结束。