[发明专利]针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法

说明书

本发明涉及针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法，包括：小麦种子表面消毒及育苗；纹枯病菌菌株活化、培养后打取菌碟；将待测药剂配制成系列浓度的稀溶液；将发芽小麦种子分成供试组及对照组；将菌碟套至发芽小麦种子的芽根部，并以灭菌无纺布包裹；将供试组放入稀溶液，将对照组放入自来水，进行吸收；供试组及对照组分别浇溉自来水进行培养，并在培养结束时量病斑长度；经统计、计算得出待测药剂的EC₅₀值。本发明通过无菌无纺布包裹接种纹枯病菌的发芽小麦种子，然后施加药剂，从而在病原菌‑寄主植物‑杀菌剂三者共同存在的环境下评价或筛选防治药剂，更符合田间试验效果，具有更好的参考价值。

技术领域

本发明涉及一种针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法，可用于筛选防治小麦纹枯病的有效药剂，同时也可用于评价此类药剂的防治效果，属于药剂筛选及评价技术领域。

背景技术

由禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)侵染小麦引起的纹枯病是一种世界性病害，几乎遍布世界各温带小麦种植区。在我国，小麦生产中氮肥的大量使用、免(少)耕等精简化耕作措施的推广和感病品种的大面积应用，导致土壤中纹枯病菌大量积累，小麦纹枯病逐年加重，已成为长江中下游和黄淮麦区小麦增产的重要制约因素。

目前尚未发现高抗纹枯病的小麦品种，施用化学杀菌剂仍然是防治小麦纹枯病的主要措施。在杀菌剂的研发推广应用过程中，室内生测法是发现新化合物的生物活性、优化杀菌剂剂型配方、评价杀菌剂活性的基本方法。

现有针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测法均在PDA平板上进行，即在PDA培养基中添加不同浓度的药剂，然后接种纹枯病菌，培养5-7天后量取菌落直径，并与对照平板相比较，计算抑菌率，由此来评价药剂活性。然而，该方法脱离了小麦这一寄主植物，不利于评价病原菌-寄主植物-杀菌剂三者共同存在时杀菌剂的防治效果。

经检索发现，专利号CN200810196380.5，授权公告号CN101348825B，名称《小麦纹枯病抗性苗期鉴定的方法》的中国发明专利，其方法是将小麦纹枯病菌菌种活化培养，获得菌丝；通过培养基使菌丝长满牙签后形成有菌牙签；将待鉴定的小麦品种或品系的种子在培养皿中于25℃下萌发后播种于20cm营养钵中生长，播种后30天，将有菌牙签嵌入麦苗茎杆与叶鞘内，接种处缠绕浸湿的医用脱脂棉球，并用双层遮阳网覆盖，通过弥雾器使接种幼苗在近100％饱和的相对湿度下48h，然后去除遮阳网，幼苗正常生长管理，每天喷水一次；接种后30d，对苗期单株小麦材料进行纹枯病病害等级鉴定；根据病害评价等级计算病情指数。

专利号CN201510227051.2，授权公告号CN104823553B，名称《一种测试小麦品种抗病性的方法及其应用》的中国发明专利，其方法包括以下步骤：1)菌液处理：先将测试小麦抗病性的菌液添加到发芽盒内，加少量水做成菌床；再将待测麦粒放置于发芽盒中，并用水将盒内的菌液补齐至能平浸待测麦粒的胚部；2)水对照处理：将待测麦粒放置于发芽盒中纸床上，添加水至与菌液处理中液体的总体积相同；3)计算病菌为害率；4)抗病性判定：通过病菌为害率，对应国家或省区规定的标准判定小麦的抗病性。

虽然上述技术方案都给出了将病原菌与小麦进行接触的技术手段，但是由于它们都是小麦抗病性的测试/鉴定方法，不需要考虑对药剂防治效果的评价，并不能从中获知该如何处理病原菌-寄主植物-杀菌剂三者共同存在时的情况，也不能从中获知具体的药剂防治效果评价方法。因此，亟待研发出能解决这些问题的技术手段。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：克服现有技术存在的问题，提供一种针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法，能在病原菌-寄主植物-杀菌剂三者共同存在的环境下评价或筛选防治药剂，更符合田间试验效果，具有更好的参考价值。

本发明解决其技术问题的技术方案如下：

一种针对小麦纹枯病防治药剂的室内生测方法，其特征是，包括以下步骤：