[发明专利]适用于检测牛奶中残留的β‑内酰胺酶的色差检测方法

摘要

本发明公开了适用于检测牛奶中残留的β‑内酰胺酶的色差检测方法，利用色度计检测法，以无抗奶粉为原料配制一定浓度的牛奶溶液，定量吸取后分别加入不同量的β‑内酰胺酶储备液和足量的底物头孢硝噻吩，水浴一段时间后，发生颜色变化，并用色差计测定，绘制不同浓度β‑内酰胺酶的标准曲线，再根据标准曲线法测定待测样品中的β‑内酰胺酶含量；本发明所采用的显色反应，变色明显，灵敏度高，耗时短，相比较其他检测方法，可以降低β‑内酰胺酶的最低检出限，适用于目前我国市售牛奶检测的现状。

主权项

适用于检测牛奶中残留的β‑内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：利用色差计检测样品中β‑内酰胺酶与头孢硝噻吩显色后底物的色度，并通过标准曲线法测定出样品中β‑内酰胺酶的含量，具体操作步骤如下：(1)吸取10mL牛奶待测样品置入无色透明试管中；(2)将上述步骤(1)的试管中加入浓度为500mg/ml的头孢硝噻吩溶液和1‑5U/μl的β‑内酰胺酶储备液震荡均匀；(3)将上述步骤(2)中的试管管口以保鲜膜封口，并置于水浴锅中反应，水浴完成后进行降低酶活；(4)将上述步骤(3)灭酶后的试管迅速取出震荡均匀，并进行色差计测定，记录测定数据，包括但不局限于：明度(L)、a通道(洋红色至绿色的范围)、b通道(黄色至蓝色的范围)、色差(ΔE)；(5)根据上述步骤(4)中测定的色差值数据，计算出样品中β‑内酰胺酶的含量。