[发明专利]适用于检测牛奶中残留的β‑内酰胺酶的色差检测方法

权利要求书

1.适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：利用色差计检测样品中β-内酰胺酶与头孢硝噻吩显色后底物的色度，并通过标准曲线法测定出样品中β-内酰胺酶的含量，具体操作步骤如下：

(1)吸取10mL牛奶待测样品置入无色透明试管中；

(2)将上述步骤(1)的试管中加入浓度为500mg/ml的头孢硝噻吩溶液和1-5U/μl的β-内酰胺酶储备液震荡均匀；

(3)将上述步骤(2)中的试管管口以保鲜膜封口，并置于水浴锅中反应，水浴完成后进行降低酶活；

(4)将上述步骤(3)灭酶后的试管迅速取出震荡均匀，并进行色差计测定，记录测定数据，包括但不局限于：明度(L)、a通道(洋红色至绿色的范围)、b通道(黄色至蓝色的范围)、色差(ΔE)；

(5)根据上述步骤(4)中测定的色差值数据，计算出样品中β-内酰胺酶的含量。

2.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中设置共六组试管，其中一组为空白对照组。

3.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：β-内酰胺酶的最低检出限在1U/mL。

4.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中牛奶待测样品，采用无抗奶粉和50℃-100℃温水，以1:6—1:10的比例进行配置待用。

5.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中水浴反应温度为30℃，水浴时间为3min。

6.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中采用冰水浴降低酶活，降低酶活反应时间为5s-20s。

7.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中β-内酰胺酶储备液用量分别为0μl、2μl、4μl、6μl、8μl、10μl。

8.根据权利要求1所述的适用于检测牛奶中残留的β-内酰胺酶的色差检测方法，其特征在于：所述头孢硝噻吩溶液用量为30μl—50μl。