[发明专利]一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法

摘要

本发明公开了一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法，基于索氏提取方法，结合水煮回流方式进行前处理，可有效将紫草渣去除，通过有机溶剂萃取结合低温高速离心，可有效降低有机物残留，同样简化了操作步骤；以紫外测定获得标准液为同样步骤衍生化后的葡萄糖，蔗糖，麦芽糖的参数，将样品进行HPLC分析后与标准液进行对比测定，提高了测定精度。

主权项

一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法，其特征在于：包括以下步骤：S1，固定水煮温度为100℃,并固定水量比为1:100，其中水量比（w/w）=样品量:水量，取4g粉碎了的紫草与400ml水置于500ml的圆底烧瓶中进行水煮；S2，脱蛋白：S21，先将溶液过滤除去紫草渣，然后加5%的活性炭脱色，煮沸3‑5分钟，再过滤；S22，将溶液蒸馏至一定体积，剩下的溶液与乙醇用1:5的体积混合，冷冻静置过夜可得絮状沉淀，然后再旋转离心，去掉上层清夜，固体放在红外灯烘干即可得产品；S3，测定：S31，取少量样品，用去离子水溶解；S32，取粗产品溶液4ml与氯仿‑正丁醇混合液1ml，混合充分振摇30min，离心1min，再将水相与氯仿相分开，以离子水为空白溶液作紫外测定；S33，将干燥过的待测样品置于小试管里，依次加入100ulPMP溶液1‑苯基‑3‑甲基‑5‑吡啶啉酮和100ulNaOH,混匀后混于70℃水浴中加热反应30min,取出室温放置10min；S34，加入125ul、0.3mol/l的盐酸溶液, 中和，混匀后用2.5ml乙酸异戊脂萃取，涡旋3min，离心15min，小心弃去有机层，再萃取一次取下层；S35，加水750ml混匀并离心15min，用HPLC分析。