[发明专利]一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法

权利要求书

1.一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1，固定水煮温度为100℃,并固定水量比为1:100，其中水量比（w/w）=样品量:水量，取4g粉碎了的紫草与400ml水置于500ml的圆底烧瓶中进行水煮；

S2，脱蛋白：

S21，先将溶液过滤除去紫草渣，然后加5%的活性炭脱色，煮沸3-5分钟，再过滤；

S22，将溶液蒸馏至一定体积，剩下的溶液与乙醇用1:5的体积混合，冷冻静置过夜可得絮状沉淀，然后再旋转离心，去掉上层清夜，固体放在红外灯烘干即可得产品；

S3，测定：

S31，取少量样品，用去离子水溶解；

S32，取粗产品溶液4ml与氯仿-正丁醇混合液1ml，混合充分振摇30min，离心1min，再将水相与氯仿相分开，以离子水为空白溶液作紫外测定；

S33，将干燥过的待测样品置于小试管里，依次加入100ulPMP溶液1-苯基-3-甲基-5-吡啶啉酮和100ulNaOH,混匀后混于70℃水浴中加热反应30min,取出室温放置10min；

S34，加入125ul、0.3mol/l的盐酸溶液, 中和，混匀后用2.5ml乙酸异戊脂萃取，涡旋3min，离心15min，小心弃去有机层，再萃取一次取下层；

S35，加水750ml混匀并离心15min，用HPLC分析。

2.根据权利要求1所述的一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法，其特征在于：步骤S1中，水煮时间至少为10h。

3.根据权利要求1所述的一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法，其特征在于：步骤S32中，氯仿-正丁醇混合液的混合比为4:1。

4.根据权利要求1所述的一种基于索氏提取的紫草素提取和测定方法，其特征在于：步骤S32中，取用至少4-5份样品，并重复过程4-5次，分别做紫外测定，以降低粗产品中杂质对紫外测定的影响。