[发明专利]羧基化聚乳酸羟基乙酸包裹PFOB纳米超声造影剂的制备方法

摘要

本发明属于医学检测技术领域，具体涉及一种羧基化聚乳酸羟基乙酸包裹PFOB纳米超声造影剂的制备方法。本发明是以PLGA‑COOH及末端修饰的聚乙二醇为原料，选取分子量为13K~23K的PVA制备1%的PVA溶液，采用EDC/NHS交联活化法合成PLGA‑PEG‑COOH，设计作为膜材PLGA‑PEG‑COOH与PLGA‑COOH的配比，以该配比的混合膜材为载体包裹PFOB，采用改良的溶剂挥发制备包裹PFOB的纳米超声造影剂，通过方法的改良和优化处方，形成了壳核结构的纳米颗粒。本发明的纳米颗粒显影剂不但具有良好的稳定性，还在体内外具有良好的显影效果，被动靶向肿瘤组织，羧基部分将来接上靶头，主动靶向肿瘤，能够在分子水平进行肿瘤的诊断和治疗。

主权项

一种羧基化聚乳酸羟基乙酸包裹PFOB纳米超声造影剂的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：（1） 合成PLGA‑PEG‑COOH：称取PLGA‑COOH 1.00g，加入重蒸氯仿5 mL，涡旋使PLGA‑COOH溶解在氯仿中；将32 mg NHS、50 mg EDC·HCl溶于1 mL重蒸氯仿中，涡旋后滴加到PLGA‑COOH的氯仿溶液中，室温磁力搅拌反应12 h，得淡黄色澄清透明粘稠液，加入5 mL‑20℃冰甲醇沉析，反复洗涤后45℃真空干燥2 h得活化酯PLGA‑NHS；称取1.00 g活化酯PLGA‑NHS，加入3 mL重蒸氯仿，涡旋使活化酯PLGA‑NHS溶解在氯仿中，然后加入250 mg NH2‑PEG‑COOH 和72 mg 或92 μL的N,N‑二异丙基乙胺，室温磁力搅拌反应24 h，加入预冷甲醇沉析，反复洗涤后45℃真空干燥24 h，即得PLGA‑PEG‑COOH；（2） 制备纳米UCA：配置分子量为13K~23K的1% PVA水溶液，称取PVA 1g，加入100 mL超纯水，静置溶胀过夜，在80℃水浴条件下磁力搅拌30 min，待PVA溶解且溶液为透明时冷却至室温，4℃下保存；配置有机相：称取混合膜材PLGA‑PEG‑COOH 和 PLGA‑COOH 100mg置于西林瓶中，先后加入4 mL CH2Cl2和60 μL PFOB，避光室温放置约30 min，待膜材料完全溶解且瓶底不见PFOB液滴后即得澄清透明有机相；乳化：取20 mL1% PVA水溶液于50 mL玻璃离心管内，将上述有机相吹打后转移至管内，冰浴条件下8000 rpm高速剪切2 min，得到微米级牛奶样初乳，将初乳在冰浴条件下用超声细胞粉碎仪粉碎2 min，得到纳米级乳白色复乳；有机溶剂挥发：将上述复乳转移至50 mL烧杯中，在30℃、800 rpm下磁力搅拌 3 h，挥去有机溶剂CH2Cl2，即得淡蓝色乳光的UCA溶液；UCA的初步处理：将上述得到的UCA溶液低速离心除去少许沉淀及大粒子，上清过0.45 μm水系滤膜，得到滤液即为纳米超声造影剂，其中的纳米颗粒直径210.6±2.9 nm。