[发明专利]高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株的培养方法及其应用有效
申请号: | 201710687334.4 | 申请日: | 2017-08-11 |
公开(公告)号: | CN107974432B | 公开(公告)日: | 2021-04-23 |
发明(设计)人: | 钱泓;吴有强;卞广林;吴素芳;车影;查银河 | 申请(专利权)人: | 浙江海隆生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10 |
代理公司: | 北京乾诚五洲知识产权代理有限责任公司 11042 | 代理人: | 付晓青;李广文 |
地址: | 312000 浙江省绍兴市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株的培养方法及其应用,所述的培养方法包括以下步骤:1)将高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株在1号培养基中逐级放大培养;2)将放大培养后的细胞转入生物反应器中进行发酵培养,在2号培养基中进行搅拌培养,发酵培养初期培养温度为36.5~37.5℃,pH为7.05~7.25,从发酵培养的120±2h开始,将培养温度下调至31.5~32.5℃,并将pH下调至6.90~7.10;在整个发酵培养的过程中,控制溶氧为20%~60%;在生物反应器中发酵的第12天后,收获细胞发酵液。本发明的培养方法获得的猪瘟E2蛋白产高、且具有更好的可操作性和实用性,因此,本发明更有利于扩大培养规模。 | ||
搜索关键词: | 高效 分泌 表达 猪瘟 e2 蛋白 cho 细胞株 培养 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株的培养方法,其特征在于,所述培养方法包括以下步骤:1)将高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株在无血清培养基中逐级放大培养;2)将放大培养后的细胞转入生物反应器中在无血清培养基中进行发酵培养,所述发酵培养的初期培养温度为36.5~37.5℃,pH为7.05~7.25;从发酵培养的120±2h开始,将培养温度下调至31.5~32.5℃,并将pH下调至6.90~7.10,其中,需在96±2h和216±2h时添加无血清培养基;在整个发酵培养的过程中,控制溶氧为20%~60%;在生物反应器中发酵的第12天后,收获细胞发酵液。
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