[发明专利]一种针对中国人群常见地贫突变基因的快速检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种针对中国人群常见地贫突变基因的快速检测试剂盒，其包括针对‑‑SEA、‑‑THAI、‑α2.4、‑α21.9、HPFH‑SEA和DBT设计的引物，针对‑α4.2和‑α3.7设计的引物，针对αCSα、αQSα、αWestmeadα、β‑90、β‑29、β‑28、βCap+40‑43、βInt M、βInt CD、βCD14‑15、βCD17、βCD26、β27/28、βIVS‑I‑1、βIVS‑I‑5、βCD37、βCD41‑42、βCD43、βCD71–72、βCD95、βIVS‑II‑654设计的各引物及检测性别的引物。该试剂盒可快速、准确的检测中国人群常见地贫突变基因。

主权项

一种针对中国人群常见地贫突变基因的快速检测试剂盒，其特征在于：包括针对缺失型地贫基因‑‑SEA、‑‑THAI、‑α2.4、‑α21.9、HPFH‑SEA和Gγ+(Aγδβ)0设计的引物，针对缺失型地贫基因‑α4.2和‑α3.7采用Y1区段和Y2区段相对定量分析设计的引物，针对非缺失型地贫等位基因αCSα、αQSα、αWestmeadα、β‑90、β‑29、β‑28、βCap+40‑43、βIntM、βIntCD、βCD14‑15、βCD17、βCD26、β27/28、βIVS‑I‑1、βIVS‑I‑5、βCD37、βCD41‑42、βCD43、βCD71–72、βCD95、βIVS‑II‑654设计的引物，针对非缺失型地贫等位基因αCSα、αQSα、αWestmeadα、β‑28、βCD17、βCD26、β27/28、βIVS‑I‑1、βCD41‑42、βCD43、βCD71–72、βIVS‑II‑654设计的正常对照引物，以及检测性别的AMXY引物，具体的引物名称及序列如下：Beta1‑F：5’‑TCCTAAGCCAGTGCCAGAAGAGC‑3’；Beta2‑R：5’‑CCTGAGACTTCCACACTGATGC‑3’；Beta3‑R：5’‑AGTTGGACTTAGGGAACAAAGGAAC‑3’；CQW‑co‑R：5’‑ACCTCCATTGTTGGCACATTCC‑3’；AMXY‑6FAM‑F：5’‑6‑FAM‑CCCTGGGCTCTGTAAAGAATAGTG‑3’；AMXY–R：5’‑ATCAGAGCTTAAACTGGGAAGCTG‑3’；CD37M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑GGACTCAAAGAACCTCTGGGACT‑3’；IntM‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑CAAAAATCCTCAGGAGTCAGTTGCACT‑3’；‑90M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑GTAGATTGGCCAACCCAAGGGTA‑3’；‑28M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑CAATAGATGGCTCTGCCCTGACTAC‑3’；‑29M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑GATGGCTCTGCCCTGCCTTTC‑3’；IntCD‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑CCTCAGGAGTCAGATGCATCC‑3’；CD17M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑CAACTTCATCCACGTTCGCCTA‑3’；Cap+40‑43M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑GATGCACCATGGTGTCTGAGG‑3’；CD14‑15(+G)M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑CCACGTTCACCTTGCTCTACCA‑3’；CD26M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑ACCAACCTGCACAGGGTCTT‑3’；IVS‑Ⅰ‑1M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑CTGTCTTGTAACCTTGATGCCAAA‑3’；IVS‑Ⅰ‑5M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑AACTTAAACCTGTCTTGTAACCTTGACAG‑3’；CD27/28(+C)M‑6FAM‑R：5’‑6FAM‑TTTTGATACCAACCTGACCAGGAGC‑3’；CD71‑72(+A)M‑6FAM‑F：5’‑6FAM‑CAAGAAAGTGCTCGGTGCCTGTAA‑3’；CD95M‑6FAM‑F：5’‑6FAM‑GTGAGCTGCACTGTGACGAAG‑3’；CD43M‑6FAM‑F：5’‑6FAM‑CCTTGGACCCAGAGGTTCGTTT‑3’；CD41‑42M‑6FAM‑F：5’‑6FAM‑CAAAAAAAAAACAAAACTACCCTTGGACCCAGATGTTG‑3’；654M‑6FAM‑F：5’‑6FAM‑CAGTGATAATTTCTGGGTTGAGGT‑3’；WS‑N‑ROX‑F：5’‑ROX‑AGTTCACCTCTGCGGTGCAC‑3’；CS‑N‑ROX‑F：5’‑ROX‑CGTGCTGACCTCCAAATACTGTT‑3’；QS‑N‑ROX‑F：5’‑ROX‑CTGCGGTGCAAGCCTACCT‑3’；Y1‑Y2‑HEX‑F：5’‑HEX‑CAGGGATGCACCCACTGGCA‑3’；Y1‑Y2‑R：5’‑CTCGACACGCATCTGCTCAGGGGTGAGGAAGGAAGGGGTG‑3’；‑28N‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑TAGATGGCTCTGCCCTGACATT‑3’；CD17N‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑CAACTTCATCCACGTTCACCAT‑3’；CD26N‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑ACCAACCTGCTCAGGGACTC‑3’；IVS‑Ⅰ‑1N‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑CTGTCTTGTAACCTTGATACCATC‑3’；CD27/28N‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑AAAATGATACCAACCTGCCCAGCGC‑3’；CD71‑72N‑TAMRA‑F：5’‑TAMRA‑CAAGAAAGTGCTCGGTGCCTTGAG‑3’；43/41‑42N‑TAMRA‑F：5’‑TAMRA‑CCTTGGACCCAGAGGTTCCTTG‑3’；654N‑TAMRA‑F：5’‑TAMRA‑CAGTGATAAGTTCTGGGTTAAGGC‑3’；WS‑M‑HEX‑F：5’‑HEX‑GAGTTCACCCCTGCGGTTCAG‑3’；CS‑M‑HEX‑F：5’‑HEX‑CGTGCTGACCTCCAAATACAGTC‑3’；QS‑M‑HEX‑F：5’‑HEX‑CTGCGGTGCACGGCTCACC‑3’；THAI‑HEX‑R：5’‑HEX‑CTTGGATCTGCACCTCTGGGTAGG‑3’；THAI‑F：5’‑GAATAAAGCGAGAGGAATCACATTCCTC‑3’；SEA‑HEX‑F：5’‑HEX‑AGAAGCTGAGTGATGGGTCCG‑3’；SEA‑R：5’‑TGGACTTAAGTGATCCTCCTGCCC‑3’；HPFH‑F：5’‑AAAACCAGCCTCATGGTAGCAGAATC‑3’；HPFH‑M‑FAM‑R：5’‑6FAM‑TGGTATCTGCAGCAGTTGCC‑3’；DBT‑M‑FAM‑F：5’‑6FAM‑CCAGAAATTGCCTCATGTCTCT‑3’；DBT‑R：5’‑CACATATAAAATGCTGCTAATGCTTCATTAC‑3’；2.4‑HEX‑F：5’‑HEX‑ACCACGACCTCTAGGCCAGT‑3’；2.4‑R：5’‑CAACCAGCCCTCTGCTGTAC‑3’；21.9‑F：5’‑CTGTGGGGAGAGGACAGTGAG‑3’；21.9‑HEX‑R：5’‑HEX‑CTGTTATTCCCACCCACCCTTC‑3’；上述引物中，“M”代表突变位点，“N”代表正常对照位点，FAM是指羟基荧光素，ROX是指羧基‑X‑罗丹明，HEX是指六氯‑6‑甲基荧光素，TAMRA是指羧基四甲基罗丹明。