[发明专利]依诺肝素的制备方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，公开了一种依诺肝素的制备方法，包括成盐、酯化、碱解、萃取、纯化和脱色，其中，萃取是使用1~2倍碱解溶液量的疏水有机溶剂对碱解溶液进行萃取2~3次，然后过滤取滤液；脱色是向60~80℃、pH为6.0~7.0的粗品依诺肝素溶液中加入2~3%粗品依诺肝素溶液体积的活性炭对其进行脱色25~40min，过滤除活性炭，降温至室温，调pH至6~7，加质量分数为15%的氯化钠混合均匀，过滤得滤液，向滤液中加入3倍甲醇析出沉淀，抽滤、洗涤、烘干所述沉淀得精品依诺肝素。本方法中碱解后萃取除杂，除杂后再进行活性炭脱色，脱色效果好，最终的依诺肝素产品纯度较高，对产品分子量无影响，工艺简便。

主权项

一种依诺肝素的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：（1）成盐：使用肝素钠溶液和苄索氯铵溶液制备肝素季铵盐；（2）酯化：将所述肝素季铵盐溶于二氯甲烷后，加入氯化苄搅拌酯化生成肝素苄酯；（3）碱解：将所述肝素苄酯在碱性条件下进行碱解反应，然后将反应液调至中性后向其中加入盐，搅拌均匀得碱解溶液；（4）萃取：使用1~2倍所述碱解溶液量的疏水有机溶剂对所述碱解溶液进行萃取2~3次，然后过滤取滤液；（5）纯化：向所述滤液中加入3倍甲醇析出沉淀收集得粗品依诺肝素；（6）脱色：将所述粗品依诺肝素溶于水制备成粗品依诺肝素溶液，控制所述粗品依诺肝素溶液的温度在60~80℃、pH为6.0~7.0，向其中加入活性炭对其进行脱色25~40min，过滤除去所述活性炭，降温至室温，调pH至6~7，加入盐混合均匀，过滤得滤液，向滤液中加入3倍甲醇析出沉淀，抽滤、洗涤、烘干所述沉淀得精品依诺肝素。