[发明专利]柑橘类病毒cDNA二聚体及其侵染性克隆的快速制备新方法在审
| 申请号： | 201710624692.0 | 申请日： | 2017-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN107287193A | 公开（公告）日： | 2017-10-24 |
| 发明（设计）人： | 曹孟籍;王亚飞;周常勇 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/63;C12R1/93 |
| 代理公司： | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙)50211 | 代理人： | 邹晓艳 |
| 地址： | 400712*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种柑橘类病毒cDNA二聚体的快速制备新方法，包括如下步骤(1)提取柑橘类病毒的总RNA；(2)利用一步法RT‑PCR对提取的总RNA进行扩增，PCR反应体系包括PrimeScript 1step Enzyme Mix、MgCl2、类病毒全长扩增引物、总RNA、无RNA酶的水；扩增完毕即得柑橘类病毒cDNA二聚体。还公开了一种柑橘类病毒侵染性克隆的快速制备新方法，先利用前述方法制备得到柑橘类病毒cDNA二聚体，然后将该二聚体克隆进T载体，获得包含该二聚体的连接产物，即得侵染性克隆。本发明方法快速、高效、稳定，方法独特，是一种全新的制备柑橘类病毒cDNA二聚体的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 柑橘 类病毒 cdna 二聚体 及其 侵染 克隆 快速 制备 新方法 | ||
【主权项】：
一种柑橘类病毒cDNA二聚体的快速制备新方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提取柑橘类病毒的总RNA；(2)利用一步法RT‑PCR对提取的总RNA进行扩增，PCR反应体系包括：PrimeScript 1step Enzyme Mix、MgCl2、类病毒全长扩增引物、总RNA、无RNA酶的水；扩增完毕即得柑橘类病毒cDNA二聚体。
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