[发明专利]一种鲜冬虫夏草的蛋白质指纹图谱的建立方法及应用有效
| 申请号： | 201710560176.6 | 申请日： | 2017-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN107402266B | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 甄达明;李文庆;陶盛昌;李文佳;钱正明;孙敏甜;李春红;唐新发 | 申请（专利权）人： | 广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N33/68 |
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| 地址： | 523808 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于中药材指纹图谱领域，具体涉及一种鲜冬虫夏草的蛋白质指纹图谱的建立方法，及其该方法在鉴别冬虫夏草中药材中的应用。该方法是将样品进行前处理后按如下色谱条件利用液质联用LC‑Q‑TOF‑MS技术进行测定：所述的色谱条件为：色谱柱：Welch Xtimate C4；填充剂：四烷基硅烷键合硅胶；流动相：A为0.1％甲酸‑水，B为0.1％甲酸‑乙腈；梯度洗脱。本发明的结果表明与现有技术相比具有以下优点和积极的效果：首次采用LC‑Q‑TOF‑MS技术建立了冬虫夏草蛋白质指纹图谱，同时确定了样品蛋白提取条件和分析条件的最优参数，灵敏度高，分离效果好，提高了结果的准确性和可靠性。最后将蛋白指纹图谱应用于冬虫夏草真伪鉴别中，可为冬虫夏草的质量控制提供参考。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 冬虫夏草 蛋白质 指纹 图谱 建立 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种冬虫夏草的蛋白质指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)制备冬虫夏草供试品溶液；/n(2)使用LC-Q-TOF-MS技术测定供试品溶液得到蛋白质指纹图谱，其中，/n高效液相色谱条件：所用的色谱柱为反相色谱柱，所述的反相色谱柱的填充剂为四烷基硅烷键合硅胶；流动相A为0.1％甲酸-水，流动相B为0.1％甲酸-乙腈；/n梯度洗脱条件：/n0min→10min：18％B→21％B；/n10min→40min：21％B→30％B；/n40min→50min：30％B→31.5％B；/n50min→70min：31.5％B→33％B；/n70min→100min：33％B→38.5％B；/n100min→130min：38.5％B→49％B；/n130min→135min：49％B→90％B；/n135min→150min：90％B→90％B；/n150min→155min：90％B→18％B。/n
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