[发明专利]一种沙棘叶片组织培养方法

摘要

本发明公开了一种沙棘叶片组织培养方法，包括以下步骤步骤一、初代培养取40日龄的试管苗叶片，剪成2.5‑3.0cm2的小块，接种到愈伤组织诱导培养基上；步骤二、继代增殖取初代培养的无根苗剪切成茎尖、带腋芽的茎段分别接种到增殖培养基上；步骤三、生根培养取继代增殖的无根苗，接种到生根培养基上；步骤四、移栽当长根的试管苗高度约5.0cm时，整瓶移出培养室，置于室温阴凉处4‑5天，揭开瓶盖，在放置4‑5d，将试管苗取出，用自来水轻轻洗去根部的琼脂，移栽到事先经高温灭过菌的基质中；本发明以沙棘无菌苗叶片为材料，选择各个培养阶段的适宜的培养基配方和适宜的移栽基质，实现较高的幼苗成活率，为其工厂化生产提供依据。

主权项

一种沙棘叶片组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、初代培养：取40日龄的试管苗叶片，剪成2.5‑3.0cm2的小块，接种到愈伤组织诱导培养基上，每瓶10‑15片叶；培养温度25℃左右，湿度50%‑70%，光照强度2000‑3000Lx，光照时间13‑16h/d；所述愈伤组织诱导培养基的配方为1/2B5+6‑BA0.5mg/L+IAA0.3mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%；步骤二、继代增殖：取初代培养的无根苗剪切成茎尖、带腋芽的茎段分别接种到增殖培养基上；所述增殖培养基的配方为1/2B5+6‑BA0.3琼脂0.6%+蔗糖3%；步骤三、生根培养：取继代增殖的无根苗，接种到生根培养基上；所述生根培养基的配方为1/2B5+IBA0.3+琼脂0.6%+蔗糖3%；步骤四、移栽：当长根的试管苗高度约5.0cm时，整瓶移出培养室，置于室温阴凉处4‑5天，揭开瓶盖，在放置4‑5d，将试管苗取出，用自来水轻轻洗去根部的琼脂，移栽到事先经高温灭过菌的基质中，将移栽后的试管苗浇透，用透明的膜盖在上方，保持湿度，逐渐通风透光；成活的幼苗用1/2B5大量元素母液浇透；所述基质由草炭土和珍珠岩1:1混合而成。