[发明专利]一种沙棘叶片组织培养方法

权利要求书

1.一种沙棘叶片组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、初代培养：取40日龄的试管苗叶片，剪成2.5-3.0cm2的小块，接种到愈伤组织诱导培养基上，每瓶10-15片叶；培养温度25℃左右，湿度50%-70%，光照强度2000-3000Lx，光照时间13-16h/d；

所述愈伤组织诱导培养基的配方为1/2B5+6-BA0.5mg/L+IAA0.3mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%；

步骤二、继代增殖：取初代培养的无根苗剪切成茎尖、带腋芽的茎段分别接种到增殖培养基上；

所述增殖培养基的配方为1/2B5+6-BA0.3琼脂0.6%+蔗糖3%；

步骤三、生根培养：取继代增殖的无根苗，接种到生根培养基上；

所述生根培养基的配方为1/2B5+IBA0.3+琼脂0.6%+蔗糖3%；

步骤四、移栽：当长根的试管苗高度约5.0cm时，整瓶移出培养室，置于室温阴凉处4-5天，揭开瓶盖，在放置4-5d，将试管苗取出，用自来水轻轻洗去根部的琼脂，移栽到事先经高温灭过菌的基质中，将移栽后的试管苗浇透，用透明的膜盖在上方，保持湿度，逐渐通风透光；成活的幼苗用1/2B5大量元素母液浇透；

所述基质由草炭土和珍珠岩1:1混合而成。

2.根据权利要求1所述的沙棘叶片组织培养方法，其特征在于，步骤四中移栽后的最初的一周内湿度基本控制在95%以上，逐渐延长通风和光照时间，15d左右完全揭开帘子；白天温度应控制在25℃，夜间15-18℃。