[发明专利]利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法

摘要

本发明公开了一种利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法。将已贴壁的雪旺细胞经消化，离心，加入溶有凝胶因子的细胞全培养基并吹散，得到含有凝胶因子的雪旺细胞悬浮液；将所得细胞悬浮液和冻存保护剂导入微通道中；将微通道置于3～5℃冰水浴中，平衡4～5min；最后将微通道直接置于程序降温盒，并放入‑82～‑78℃冰箱。由于超分子水凝胶在受限空间中形成的交联网络结构较非受限空间更加紧密，因此在微通道中的超分子水凝胶比微通道外的超分子水凝胶对细胞的冷冻保护更好。与传统软刻蚀法得到的微通道装置相比，利用玻璃毛细管得到的微流控装置成本更低，制作更为简单，且可冻存体积更大。

主权项

1.利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：将已贴壁的雪旺细胞经消化，离心，加入溶有凝胶因子的细胞全培养基并吹散，得到含有凝胶因子的雪旺细胞悬浮液；将所得细胞悬浮液和冻存保护剂导入微流控装置中；所述的微流控装置由圆形毛细管、方形毛细管、聚四氟乙烯管、聚氨酯管组装而成：将圆形毛细管一端插入到方形毛细管中，保证方形毛细管的内壁和圆形毛细管的外壁紧贴；所述方形毛细管的长度较长；使用聚四氟乙烯管一端套住圆形毛细管的伸出端并密封；使用聚氨酯管套住聚四氟乙烯管、圆形毛细管和方形毛细管；所述聚氨酯管与方形毛细管重合的一端缩小管口径并密封，另一端即为冻存保护剂的入口；所用聚氨酯管侧面开有孔，聚四氟乙烯管口从孔中伸出，即为细胞悬浮液入口；将微流控装置置于3～5℃冰水浴中，平衡4～5min；最后将微流控装置直接置于程序降温盒，并放入‑82～‑78℃冰箱。