[发明专利]利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法

权利要求书

1.利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：

将已贴壁的雪旺细胞经消化，离心，加入溶有凝胶因子的细胞全培养基并吹散，得到含有凝胶因子的雪旺细胞悬浮液；

将所得细胞悬浮液和冻存保护剂导入微流控装置中；所述的微流控装置由圆形毛细管、方形毛细管、聚四氟乙烯管、聚氨酯管组装而成：将圆形毛细管一端插入到方形毛细管中，保证方形毛细管的内壁和圆形毛细管的外壁紧贴；所述方形毛细管的长度较长；使用聚四氟乙烯管一端套住圆形毛细管的伸出端并密封；使用聚氨酯管套住聚四氟乙烯管、圆形毛细管和方形毛细管；所述聚氨酯管与方形毛细管重合的一端缩小管口径并密封，另一端即为冻存保护剂的入口；所用聚氨酯管侧面开有孔，聚四氟乙烯管口从孔中伸出，即为细胞悬浮液入口；将微流控装置置于3～5℃冰水浴中，平衡4～5min；

最后将微流控装置直接置于程序降温盒，并放入-82～-78℃冰箱。

2.如权利要求1所述利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于所述的凝胶因子为低分子量的氨基酸类凝胶因子；其浓度为0.75g/L，相转变温度为6-7℃。

3.如权利要求1所述利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于所述的细胞全培养基为含有10vol％胎牛血清和1vol％双抗的RPMI1640全培养基。

4.如权利要求1所述利用受限空间中超分子水凝胶冻存雪旺细胞的方法，其特征在于所述的冻存保护剂为二甲基亚砜；浓度为6-10vol％。