[发明专利]双sgRNA表达质粒及其文库的构建方法有效

专利信息
申请号: 201710262042.6 申请日: 2017-04-20
公开(公告)号: CN107090466B 公开(公告)日: 2020-02-28
发明(设计)人: 谢震;马大程 申请(专利权)人: 清华大学;北京合生基因科技有限公司
主分类号: C12N15/66 分类号: C12N15/66;C12N15/113;C12N15/63;C40B40/06;C40B50/06
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;任凤华
地址: 100084 北京市海淀区北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种双sgRNA表达质粒及其文库的构建方法。本发明所提供的方法一是利用两轮golden gate拼装技术,将预先设计在寡核苷酸上的编码双sgRNA中的间隔RNA的DNA片段插入到载体中;方法二是利用三轮golden gate拼装技术构建随机双敲除sgRNA表达质粒文库。本发明所提供的构建双sgRNA表达质粒文库的方法与现有方法相比,操作更加简便且大大缩短了构建时间。本发明对于鉴定非编码区基因的生物学功能以及鉴定基因与基因的相互作用具有重要意义。
搜索关键词: sgrna 表达 质粒 及其 文库 构建 方法
【主权项】:
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