[发明专利]一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器

摘要

本发明提供了一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器，其制备为在电极上依次修饰有iDNA层、Helper层和均相反应混合液。本发明利用了核酸适配体的特异性识别，利用鼠伤寒沙门氏菌的aptamer作为识别物质实现了对目标物鼠伤寒沙门氏菌的高特异性检测；利用核酸工具酶，实现了目标物的循环利用，起到了信号放大的作用。

主权项

1.一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器，其特征在于，其采用如下制备方法制备而成：（1）对电极进行预处理；（2）将iDNA与Helper的混合液修饰到电极表面；（3）将均相反应产物修饰到电极表面；所述iDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述Helper的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述的步骤（3）将均相反应产物修饰到电极表面的操作步骤如下：① 将14μL灭菌水、2μL 10×的NE Buffer缓冲液、2μL 10 μM P1和2μL 10 μM P2加入离心管中，震荡30 s，放入90 ℃的恒温箱中退火10 min，自然冷却至室温；② 将12μL灭菌水、2μL 10×的NE Buffer缓冲液、2μL 10 nM aptamer、2μL 10 nM P3和2μL待测目标物加入离心管中，震荡30 s，放入37 ℃的恒温箱中孵育2 h；③ 将步骤①溶液加入步骤②溶液中，然后再加入2μL 20 U/μL Exonuclease Ⅲ，震荡30 s，放入37 ℃的恒温箱中孵育2 h；④将③中溶液滴加到修饰好电极上，将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h，清洗；所述aptamer的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。