[发明专利]一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器有效

专利信息
申请号: 201710252820.3 申请日: 2017-04-18
公开(公告)号: CN107102047B 公开(公告)日: 2019-03-26
发明(设计)人: 刘素;裴倩倩;黄加栋;王玉;王虹智;郭玉娜 申请(专利权)人: 济南大学
主分类号: G01N27/327 分类号: G01N27/327
代理公司: 济南泉城专利商标事务所 37218 代理人: 张世静
地址: 250022 山东*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 伤寒 沙门氏菌 生物 传感器
【权利要求书】:

1.一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器,其特征在于,其采用如下制备方法制备而成:

(1)对电极进行预处理;

(2)将iDNA与Helper的混合液修饰到电极表面;

(3)将均相反应产物修饰到电极表面;

所述iDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;

所述Helper的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;

所述的步骤(3)将均相反应产物修饰到电极表面的操作步骤如下:

① 将14μL灭菌水、2μL 10×的NE Buffer缓冲液、2μL 10 μM P1和2μL 10 μM P2加入离心管中,震荡30 s,放入90 ℃的恒温箱中退火10 min,自然冷却至室温;

② 将12μL灭菌水、2μL 10×的NE Buffer缓冲液、2μL 10 nM aptamer、2μL 10 nM P3和2μL待测目标物加入离心管中,震荡30 s,放入37 ℃的恒温箱中孵育2 h;

③ 将步骤①溶液加入步骤②溶液中,然后再加入2μL 20 U/μL Exonuclease Ⅲ,震荡30 s,放入37 ℃的恒温箱中孵育2 h;

④将③中溶液滴加到修饰好电极上,将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h,清洗;

所述aptamer的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;

所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;

所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,步骤(2)的操作步骤如下:将10μL的10 μM 的iDNA与10 μM Helper的混合液滴加到经过预处理的电极表面,在37℃下孵育2h。

3. 根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,步骤(1)电极进行预处理操作为:电极在0.3µm和0.05 µm的氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水冲洗。

4.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,所述电极为金电极。

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