[发明专利]一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器有效
申请号: | 201710252820.3 | 申请日: | 2017-04-18 |
公开(公告)号: | CN107102047B | 公开(公告)日: | 2019-03-26 |
发明(设计)人: | 刘素;裴倩倩;黄加栋;王玉;王虹智;郭玉娜 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 张世静 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 伤寒 沙门氏菌 生物 传感器 | ||
1.一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器,其特征在于,其采用如下制备方法制备而成:
(1)对电极进行预处理;
(2)将iDNA与Helper的混合液修饰到电极表面;
(3)将均相反应产物修饰到电极表面;
所述iDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;
所述Helper的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;
所述的步骤(3)将均相反应产物修饰到电极表面的操作步骤如下:
① 将14μL灭菌水、2μL 10×的NE Buffer缓冲液、2μL 10 μM P1和2μL 10 μM P2加入离心管中,震荡30 s,放入90 ℃的恒温箱中退火10 min,自然冷却至室温;
② 将12μL灭菌水、2μL 10×的NE Buffer缓冲液、2μL 10 nM aptamer、2μL 10 nM P3和2μL待测目标物加入离心管中,震荡30 s,放入37 ℃的恒温箱中孵育2 h;
③ 将步骤①溶液加入步骤②溶液中,然后再加入2μL 20 U/μL Exonuclease Ⅲ,震荡30 s,放入37 ℃的恒温箱中孵育2 h;
④将③中溶液滴加到修饰好电极上,将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h,清洗;
所述aptamer的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;
所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,步骤(2)的操作步骤如下:将10μL的10 μM 的iDNA与10 μM Helper的混合液滴加到经过预处理的电极表面,在37℃下孵育2h。
3. 根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,步骤(1)电极进行预处理操作为:电极在0.3µm和0.05 µm的氧化铝浆中进行抛光处理,直到呈镜面,用PBS和二次水冲洗。
4.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,所述电极为金电极。
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