[发明专利]一种可进行多物种分子标记的单引物及其标记方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种可进行多物种分子标记的单引物及其标记方法，该引物根据真核生物基因组中基因内含子区域或调控区域富含AT设计，引物序列长度为17bp，其中，填充序列为富含GC碱基的任意序列，核心区序列由AT碱基随机排列组成，选择性碱基序列为任意碱基序列，引物可以在真核生物间通用，大大减少了引物的合成费用，也大大地提高了引物的利用率；同时，本发明的DNA分子标记方法是基于PCR反应的，多态性始于内含子序列变异及插入/缺失，该方法简单高效、多态性高、扩增条带数量丰富、结果可靠、条带易于分离及可测序等。

主权项

一种可进行多物种分子标记的单引物，其特征在于，所述单引物根据真核生物基因组中基因内含子区域或调控区域富含AT设计，单引物序列长度为17bp；所述引物序列由核心序列和选择性碱基序列组成，所述核心序列由从5’端到3’端的14个碱基组成，包括填充序列和核心区序列，其中，从5’端到3’端的第1‑第6个碱基为填充序列，从5’端到3’端的第7‑第14个碱基为核心区序列；所述选择性碱基序列由3个碱基组成，为从5’端到3’端的第15‑第17个碱基；所述填充序列为富含GC碱基的任意序列；所述核心区序列由AT碱基随机排列组成；所述选择性碱基序列为任意碱基序列；所述单引物序列为Mem1‑Mem32中的任意一条：Mem1：5’‑GCCGGCATTATTATCCA‑3’；Mem2：5’‑GCCGGCATTATTATCCC‑3’；Mem3：5’‑GCCGGCATTATTATCCG‑3’；Mem4：5’‑GCCGGCATTATTATCCT‑3’；Mem5：5’‑GCCGGCATTATTATCGA‑3’；Mem6：5’‑GCCGGCATTATTATCGC‑3’；Mem7：5’‑GCCGGCATTATTATCGG‑3’；Mem8：5’‑GCCGGCATTATTATCGT‑3’；Mem9：5’‑GCCGGCATTATTATGGA‑3’；Mem10：5’‑GCCGGCATTATTATGGC‑3’；Mem11：5’‑GCCGGCATTATTATGGG‑3’；Mem12：5’‑GCCGGCATTATTATGGT‑3’；Mem13：5’‑GCCGGCATTATTATGCA‑3’；Mem14：5’‑GCCGGCATTATTATGCC‑3’；Mem15：5’‑GCCGGCATTATTATGCG‑3’；Mem16：5’‑GCCGGCATTATTATGCT‑3’；Mem17：5’‑GGCGCCAATAATAACCA‑3’；Mem18：5’‑GGCGCCAATAATAACCC‑3’；Mem19：5’‑GGCGCCAATAATAACCG‑3’；Mem20：5’‑GGCGCCAATAATAACCT‑3’；Mem21：5’‑GGCGCCAATAATAACGA‑3’；Mem22：5’‑GGCGCCATTATTATCGC‑3’；Mem23：5’‑GGCGCCAATAATAACGG‑3’；Mem24：5’‑GGCGCCAATAATAACGT‑3’；Mem25：5’‑GGCGCCAATAATAAGGA‑3’；Mem26：5’‑GGCGCCAATAATAAGGC‑3’；Mem27：5’‑GGCGCCAATAATAAGGG‑3’；Mem28：5’‑GGCGCCAATAATAAGGT‑3’；Mem29：5’‑GGCGCCAATAATAAGCA‑3’；Mem30：5’‑GGCGCCAATAATAAGCC‑3’；Mem31：5’‑GGCGCCAATAATAAGCG‑3’；Mem32：5’‑GGCGCCAATAATAAGCT‑3’；所述单引物适用于真核生物的分子标记分析；所述真核生物为花生、水稻、玉米、甘蔗、木薯、菜心和真菌中的任意一种。