[发明专利]一种可进行多物种分子标记的单引物及其标记方法

权利要求书

1.一种可进行多物种分子标记的单引物，其特征在于，所述单引物根据真核生物基因组中基因内含子区域或调控区域富含AT设计，单引物序列长度为17bp；所述引物序列由核心序列和选择性碱基序列组成，所述核心序列由从5’端到3’端的14个碱基组成，包括填充序列和核心区序列，其中，从5’端到3’端的第1-第6个碱基为填充序列，从5’端到3’端的第7-第14个碱基为核心区序列；所述选择性碱基序列由3个碱基组成，为从5’端到3’端的第15-第17个碱基；所述填充序列为富含GC碱基的任意序列；所述核心区序列由AT碱基随机排列组成；所述选择性碱基序列为任意碱基序列；

所述单引物序列为Mem1-Mem32中的任意一条：

Mem1：5’-GCCGGCATTATTATCCA-3’；

Mem2：5’-GCCGGCATTATTATCCC-3’；

Mem3：5’-GCCGGCATTATTATCCG-3’；

Mem4：5’-GCCGGCATTATTATCCT-3’；

Mem5：5’-GCCGGCATTATTATCGA-3’；

Mem6：5’-GCCGGCATTATTATCGC-3’；

Mem7：5’-GCCGGCATTATTATCGG-3’；

Mem8：5’-GCCGGCATTATTATCGT-3’；

Mem9：5’-GCCGGCATTATTATGGA-3’；

Mem10：5’-GCCGGCATTATTATGGC-3’；

Mem11：5’-GCCGGCATTATTATGGG-3’；

Mem12：5’-GCCGGCATTATTATGGT-3’；

Mem13：5’-GCCGGCATTATTATGCA-3’；

Mem14：5’-GCCGGCATTATTATGCC-3’；

Mem15：5’-GCCGGCATTATTATGCG-3’；

Mem16：5’-GCCGGCATTATTATGCT-3’；

Mem17：5’-GGCGCCAATAATAACCA-3’；

Mem18：5’-GGCGCCAATAATAACCC-3’；

Mem19：5’-GGCGCCAATAATAACCG-3’；

Mem20：5’-GGCGCCAATAATAACCT-3’；

Mem21：5’-GGCGCCAATAATAACGA-3’；

Mem22：5’-GGCGCCATTATTATCGC-3’；

Mem23：5’-GGCGCCAATAATAACGG-3’；

Mem24：5’-GGCGCCAATAATAACGT-3’；

Mem25：5’-GGCGCCAATAATAAGGA-3’；

Mem26：5’-GGCGCCAATAATAAGGC-3’；

Mem27：5’-GGCGCCAATAATAAGGG-3’；

Mem28：5’-GGCGCCAATAATAAGGT-3’；

Mem29：5’-GGCGCCAATAATAAGCA-3’；

Mem30：5’-GGCGCCAATAATAAGCC-3’；

Mem31：5’-GGCGCCAATAATAAGCG-3’；

Mem32：5’-GGCGCCAATAATAAGCT-3’；

所述单引物适用于真核生物的分子标记分析；

所述真核生物为花生、水稻、玉米、甘蔗、木薯、菜心和真菌中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的一种可进行多物种分子标记的单引物，其特征在于，所述单引物的解链温度为51℃-61℃。

3.应用权利要求1-2任意一项所述单引物进行多物种分子标记的标记方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)按所述序列合成单引物；

(2)提取真核生物的基因组DNA，得到基因组DNA模板；

(3)利用步骤(1)的单引物与步骤(2)的基因组DNA模板在PCR扩增反应体系中进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；

(4)将步骤(3)的PCR扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，再通过溴化乙锭染色，在凝胶成像系统下拍照、保存图像和记录结果。