[发明专利]犬卵母细胞的体外成熟方法有效
申请号: | 201710099954.6 | 申请日: | 2017-02-23 |
公开(公告)号: | CN107043743B | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 冯冲;郑敏 | 申请(专利权)人: | 北京希诺谷生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/075 | 分类号: | C12N5/075 |
代理公司: | 北京睿阳联合知识产权代理有限公司 11758 | 代理人: | 张颖;王朋飞 |
地址: | 102200 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及犬卵母细胞的体外成熟(IVM)方法,尤其是涉及三阶段培养犬卵母细胞的体外成熟方法。 | ||
搜索关键词: | 犬卵母 细胞 体外 成熟 方法 | ||
【主权项】:
犬卵母细胞的三阶段体外成熟方法,其特征在于所述方法包括如下步骤:(1)以NCSU‑23作为基础培养基,添加发情母犬血清、EGF、FSH、LH及E2,每12小时换液1次,培养包裹三层以上卵丘细胞的卵丘‑卵母细胞复合体24小时;(2)采用NCSU‑23培养基,添加BSA、EGF、PMSG、HCG及E2,对步骤(1)获得的培养细胞继续培养24小时;以及(3)采用离子霉素及6‑DMAP对卵母细胞进行化学激活,激活后底部培养有输卵管上皮细胞的培养皿中,采用mSOF培养基添加BSA及EGF进行体外成熟。
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